Дифтерия

дифтерия характеристика возбудителя

Äèôòåðèÿ — îñòðàÿ èíôåêöèîííàÿ áîëåçíü, õàðàê­òåðèçóþùàÿñÿ ôèáðèíîçíûì âîñïàëåíèåì â çåâå, ãîðòàíè, ðåæå â äðóãèõ îðãàíàõ è ÿâëåíèÿìè èí­òîêñèêàöèè. Âîçáóäèòåëåì åå ÿâëÿåòñÿ Corynebacterium diphtheriae.

Òàêñîíîìèÿ. Corynebacterium îòíîñèòñÿ ê îòäåëó Firmicutes, ðîäó Corynebacterium.

Ìîðôîëîãè÷åñêèå è òèíêòîðèàëüíûå ñâîéñòâà. Âîçáóäèòåëü äèôòåðèè õàðàêòåðèçóåòñÿ ïîëèìîðôèçìîì: òîíêèå, ñëåãêà èçîãíóòûå ïàëî÷êè (íàèá. ðàñïðîñòðàíåííûå) âñòðå÷àþòñÿ êîêêîâèäíûå è âåò­âÿùèåñÿ ôîðìû. Áàêòåðèè íåðåäêî ðàñïîëàãàþòñÿ ïîä óãëîì äðóã ê äðóãó. Îíè íå îáðàçóþò ñïîð, íå èìåþò æãóòèêîâ, ó ìíîãèõ øòàììîâ âûÿâëÿþò ìèêðîêàïñóëó. Õàðàêòåðíàÿ îñîáåííîñòü — íàëè÷èå íà êîíöàõ ïàëî÷êè çåðåí âîëþòèíà (îáóñëîâëèâàåò áóëàâîâèäíóþ ôîðìó). Âîçáóäèòåëü äèôòåðèè ïî Ãðàìó îêðàøèâàåòñÿ ïîëîæè­òåëüíî.

Êóëüòóðàëüíûå ñâîéñòâà. Ôàêóëüòà­òèâíûé àíàýðîá, îïòèì. òåìïå­ðàòóðà. Ìèêðîá ðàñòåò íà ñïåöèàëüíûõ ïèòàòåëü­íûõ ñðåäàõ, íàïðèìåð íà ñðåäå Êëàóáåðãà (êðîâÿíî-òåëëóðèòîâûé àãàð), íà êîòîðîé äèôòåðèéíàÿ ïàëî÷êà äà¸ò êîëîíèè 3 òèïîâ: à) êðóïíûå, ñåðûå, ñ íåðîâíûìè êðàÿìè, ðàäèàëüíîé èñ÷åð÷åííîñòüþ, íàïîìèíàþùèå ìàðãàðèòêè; á) ìåëêèå, ÷åð­íûå, âûïóêëûå, ñ ðîâíûìè êðàÿìè; â) ïîõîæèå íà ïåðâûå è âòîðûå.

 çàâèñèìîñòè îò êóëüòóðàëüíûõ è ôåðìåíòàòèâíûõ ñâîéñòâ ðàçëè÷àþò 3 áèîëîãè÷åñêèõ âàðèàíòà C.diphtheriae: gravis, mitis è ïðîìåæóòî÷íûé intermedius.

Ôåðìåíòàòèâíàÿ àê­òèâíîñòü. Âûñîêàÿ. Ôåðìåíòèðóþò ãëê è ìàëüòîçó â îáðàçîâàíèåì êèñëîòû, íå ðàçëàãàþò ñàõàðîçó, ëàêòîçó è ìàííèò. Íå ïðîäóöèðóþò óðåàçó è íå îáðàçóþò èíäîë. Ïðîäóöèðóåò ôåðìåíò öèñòèíàçó, ðïñùåïëÿþùóþ öèñòåèí äî H2S. Îáðàçóåò êàòàëàçó, ñóêöèíàòäåãèäðîãåíàçó.

Àíòèãåííûå ñâîé­ñòâà. Î-àíòèãåíû – òåðìîñòàáèëüíûå ïîëèñàõàðèäíûå, ðàñïîëîæåíû â ãëóáèíå êëåòî÷íîé ñòåíêè. Ê-àíòèãåíû – ïîâåðõíîñòíûå, òåðìîëàáèëüíûå, ñåðîâàòîñïåöèôè÷åñêèå. Ñ ïîìîøüþ ñûâîðîòîê ê Ê-àíòèãåíó Ñ.diph. ðàçäåëÿþò íà ñåðîâàðû(58).

Ôàêòîðû ïàòîãåííîñòè. Ýêçîòîêñèí, íàðóøàþùèé ñèíòåç áåëêà è ïîðà­æàþùèé â ñâÿçè ñ ýòèì êëåòêè ìèîêàðäà, íàäïî÷å÷íèêîâ, ïî÷åê, íåðâíûõ ãàíãëèåâ. Ñïîñîáíîñòü âûðàáàòûâàòü ýêçîòîêñèí îáóñ­ëîâëåíà íàëè÷èåì â êëåòêå ïðîôàãà, íåñóùåãî tîõ-ãåí, îòâåò­ñòâåííûé çà îáðàçîâàíèå òîêñèíà. Ôåð­ìåíòû àãðåññèè — ãèàëóðîíèäàçó, íåéðàìèíèäàçó. Ê ôàê­òîðàì ïàòîãåííîñòè îòíîñèòñÿ òàêæå ìèêðîêàïñóëà.

Ðåçèñòåíòíîñòü. Óñòîé÷èâ ê âûñóøèâàíèþ, äåéñòâèþ íèçêèõ òåìïåðàòóð, ïîýòî­ìó â òå÷åíèå íåñêîëüêèõ äíåé ìîæåò ñîõðàíÿòüñÿ íà ïðåäìåòàõ, â âîäå.

Ýïèäåìèîëîãèÿ. Èñòî÷íèê äèôòåðèè — áîëüíûå ëþäè Çàðàæåíèå ïðîèñõîäèò ÷àùå ÷åðåç äûõàòåëüíûå ïóòè. Îñíîâíîé ïóòü ïåðåäà÷è âîçäóøíî-êàïåëüíûé, âîçìîæåí è êîíòàêòíûé ïóòü — ÷åðåç áåëüå, ïîñóäó.

Ïàòîãåíåç. Âõîäíûå âîðîòà èíôåêöèè — ñëèçèñòûå îáî­ëî÷êè çåâà, íîñà, äûõàòåëüíûõ ïóòåé, ãëàç, ïîëîâûõ îðãàíîâ, ðàíåâàÿ ïîâåðõíîñòü. Íà ìåñòå âõîäíûõ âîðîò íàáëþäàåòñÿ ôèáðèíîçíîå âîñïàëåíèå, îáðàçóåòñÿ õàðàêòåðíàÿ ïëåíêà, êîòî­ðàÿ ñ òðóäîì îòäåëÿåòñÿ îò ïîäëåæàùèõ òêàíåé. Áàêòåðèè âû­äåëÿþò ýêçîòîêñèí, ïîïàäàþùèé â êðîâü, — ðàçâèâàåòñÿ òîêñèíåìèÿ. Òîêñèí ïîðàæàåò ìèîêàðä, ïî÷êè, íàäïî÷å÷íèêè, íåðâíóþ ñèñòåìó.

Êëèíèêà. Ñóùåñòâóþò ðàçëè÷íûå ïî ëîêàëèçàöèè ôîðìû äèôòåðèè: äèôòåðèÿ çåâà, êîòîðàÿ íàáëþäàåòñÿ â 85—90 % ñëó÷àåâ, äèôòåðèÿ íîñà, ãîðòàíè, ãëàç, íàðóæíûõ ïîëîâûõ îð­ãàíîâ, êîæè, ðàí. Èíêóáàöèîííûé ïåðèîä ñîñòàâëÿåò îò 2 äî 10 äíåé. Çàáîëåâàíèå íà÷èíàåòñÿ ñ ïîâûøåíèÿ òåìïåðàòóðû òåëà, áîëè ïðè ãëîòàíèè, ïîÿâëåíèÿ ïëåíêè íà ìèíäàëèíàõ, óâåëè÷åíèÿ ëèìôàòè÷åñêèõ óçëîâ. Îòåêà ãîðòàíè, ðàçâè­âàåòñÿ äèôòåðèéíûé êðóï, êîòîðûé ìîæåò ïðèâåñòè ê àñôèê­ñèè è ñìåðòè. Äðóãèìè òÿæåëûìè îñëîæíåíèÿìè, êîòîðûå òàê­æå ìîãóò ÿâèòüñÿ ïðè÷èíîé ñìåðòè, ÿâëÿþòñÿ òîêñè÷åñêèé ìèîêàðäèò, ïàðàëè÷ äûõàòåëüíûõ ìûøö.

Èììóíèòåò. Ïîñëå çàáîëåâàíèÿ — ñòîéêèé, íàïðÿæåííûé àíòèòîêñè÷íûé èììóíèòåò. Îñîáîå çíà÷åíèå – îáðàçîâàíèå ÀÒ ê ôðàãìåíòó Â. Îíè íåéòðàëèçóþò äèôòåðèéíûé ãèñòîòîêñèí, ïðåäóïðåæäàÿ ïðèêðåïëåíèå ïîñëåäíåãî ê êëåòêå. Àíòèáàêòåðèàëüíûé èììóíèòåò – íåíàæíÿæåííûé, ñåðîâàòîñïåöèôè÷åí

Ìèêðîáèîëîãè÷åñêàÿ äèàãíîñòèêà. Ñ ïîìîùüþ òàìïîíà ó áîëüíîãî áåðóò ïëåíêó è ñëèçü èç çåâà è íîñà. Äëÿ ïîñòàíîâêè ïðåäâàðèòåëüíîãî äèàãíîçà âîçìîæíî ïðèìåíåíèå áàêòåðèîñêîïè÷åñêîãî ìåòîäà. Îñíîâíîé ìåòîä äèàãíîñòèêè — áàêòåðèîëîãè÷åñêèé: ïîñåâ íà ñðåäó Êëàóáåðà II (êðîâÿíî-òåëëóðèòîâûé àãàð), íà ïëîòíóþ ñûâîðîòî÷íóþ ñðåäó äëÿ âûÿâëåíèÿ ïðîäóêöèè öèñòèíàçû, íà ñðåäû Ãèññà, íà ñðåäó äëÿ îïðåäåëåíèÿ òîêñèãåííîñòè âîçáóäèòåëÿ. Âíóòðèâèäîâàÿ èäåíòèôèêàöèÿ çàêëþ÷àåòñÿ â îïðåäåëåíèè áèî- è ñåðîâàðà. Äëÿ óñêîðåííîãî îáíàðóæåíèÿ äèôòåðèéíîãî òîêñèíà ïðèìåíÿþò: ÐÍÃÀ (ðåàêöèÿ íåïðÿìîé ãåììàãëþòèíàöèè) ñ àíòèòåëüíûì ýðèòðîöèòàðíûì äèàãíîñòèêóìîì, ðåàêöèþ íåéòðàëèçàöèè àíòèòåë (î íàëè÷èè òîêñèíà ñóäÿò ïî ýôôåêòó ïðåäîòâðàùåíèÿ ãåìàããþòèíàöèè); ÐÈÀ (ðàäèîèììóííûé) è ÈÔÀ(èìóííîôåðìåíòíûé àíàëèç).

Ëå÷åíèå. Îñíîâíîé ìåòîä òåðàïèè — íåìåäëåííîå ââåäåíèå ñïåöèôè÷åñêîé àíòèòîêñè÷åñêîé ïðîòèâîäèôòåðèéíîé ëîøàäèíîé æèäêîé ñûâîðîòêè. Èììóíîãëîáóëèí ÷åëîâåêà ïðîòèâîäèôòåðèéíûé äëÿ â/â ââåäåíèÿ.

Àññîöèèðîâàííûå âàêöèíû: ÀÊÄÑ (àáñîðáèðîâàííàÿ êîêëþøíî – ñòîëáíÿ÷íàÿ âàêöèíà), ÀÄÑ (àáñîðáèðîâàííûé äèôòåðèéíî — ñòîëáíÿ÷íûé àíàòîêñèí).

Источник: http://studopedia.ru/10_129659_vozbuditel-difterii-taksonomiya-harakteristika-mikrobiologicheskaya-diagnostika-viyavlenie-antitoksicheskogo-immuniteta-spetsificheskaya-profilaktika-i-lechenie.html

1. Классификация: р. Corynebacterium, C. diphtheriae

2. Морфология: Гр+, палочка, булавовидные утолщения на концах за счет зерен волютина, неспорообразующие, располагаются под углом друг к другу в виде римских пятерок, есть микрокапсула и пили.

3. Биологические свойства:

1) требовательны к питательному субстрату.

2) культивируются на свернутой сыворотке крови и на кровяном агаре с теллуритом калия

3) образуют два типа колоний (gravis, mitis, intermedius)

4) ферментируют глюкозу с образованием кислоты, восстанавливают нитраты.

4. АГ структура: типоспецифический К-АГ, группоспецифический полисахаридный АГ КС.

5. Факторы патогенности:

1) адгезины (пили, микрокапсула)

2) инвазины (гиалуронидаза, фибринолизин, нейраминидаза)

3) гистотоксин (две субъединицы – токсический полипептид и транспортный полипептид)- блокирует синтез белка на рибосомах, действуя на фактор элонгации-2, вызывает некроз клеток.

Адгезия на эпителиоцитах миндалин, верхних дыхательных путей, коньюктивы > колонизация эпителиоцитов и возникновение воспалительного процесса > секреция гистотоксина на рецепторах мышечных кл сердца, почек, надпочечников, нервных ганглиях > блокада синтеза белка и гибель кл.

7 Клинические проявления: дифтерия дыхательных путей: а) воспаление слизистой ротоглотки с образованием пленок, плотно спаянных с подслизистой б) крупозное воспаление трахеи с образованием фибринозных пленок, слабо спаянных с подслизистой, отеком и истинных крупом. Возможны миокардиты, нефриты, периферические нефриты, дифтерия кожи, глаз, наружных половых органов.

8 Иммунитет: постинфекционный иммунитет напряжен за счет антитоксина, антибактериальные АТ (агглютинины, преципитины) не обладают протективными свойствами.

Определение антитоксического иммунитета – реакция Шика – нейтрализация токсина антитоксином. При введении 1/40 DLM дифтерийного токсина в кожу предплечья появляется покраснение и припухание, если в крови нет антитоксина.

9 Экология и эпидемиология. Источник – больные люди, чаще дети. ОПЗ – аэрозольно, реже контактно. Хорошо переносят высушивание.

10. Профилактика: специфическая – введение дифтерийного анатоксина (АКДС)

11. Лечение: антитоксическая сыворотка, АБ (пенициллин, ванкомицин, эритромицин).

Материал: из зева и носа, ватным тампоном на границе пораженной и здоровой части. Тампон помещают в пробирку с несколькими каплями физ. раствора или глицерина, чтобы не высох при транспортировке.

1. Бактериоскопия. В первый день – мазки по Леффлеру или Нейсеру. При наличии характерных палочек (расположенных в виде буквы «V» с зернами воллютина) делают заключение о выделении палочки, морфологически сходной с дифтерией. Ложно дифтерийные палочки Гофмана располагаются параллельно, не имеют зерен воллютина, окрашиваются равномерно. Окончательный ответ – только после получения чистой культуры.

Посев на среду обогащения РУ и сывороточно-теллуритовый агар. Если на чашках с сывороточно-теллуритовым агаром нет роста, делают мазок со среды обогащения и повторный высев на сывороточно-теллуритовый агар. Подозрительными на дифтерию являются колонии у биовара gravis (R-типа, темно-серые), mitis (S-типа, черные), остальные биовары – промежуточные варианты.

Из подозрительных колоний готовят мазок, посев на среды Гиса, отсев на среду Ру для накопления чистой культуры, проба на токсигенность методом двойной диффузии в агар. Учет результатов.

3. Серологическая диагностика: для определения противодифтерийного антитоксического или поствакцинального иммунитета. РПГА с эритроцитами, нагруженными дифтерийным анатоксином. Если человек иммунный, РПГА + (зонтик) в титре 1/80 и >, если нет – РПГА – (пуговка), необходима ревакцинация.

Источник: http://uchenie.net/vozbuditel-difterii/

Морфология:

Прямая или слегка изогнутая тонкая грам + палочка, неподвижная, обладает полиморфизмом, концы заостренные или булавовидные. Спор и капсул нет. Утолщены на концах за счет наличия зерен волютина ( выявляют при окраске по Леффлеру и Нейссеру) В мазках располагаются под углом , напоминают букву V.

Культуральные св-ва:

Факультативный анаэроб. Температура 37. На простых пит. средах не растет. Используют дифференциально – диагностические среды, содержащих гемолизированную кровь и теллурит Na или K, которые подавляют рост сопутствующей микрофлоры. На этих средах обр. колонии черного или серого цвета. Элективные среды накопления – агар+ нормальная лошадиная сыворотка ( среда Ру) или свернутую кровяную сыворотку + сахарный бульон ( среда Ру – Леффлера). Образуются точечные, выпуклые желто-кремовые колонии с гладкой или слегка зернистой поверхностью.

ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ:  дифтерия симптомы у взрослых инкубационный

Gravis обр. плоские, крупные, серо-черные колонии с волнообразными краями. На жидкой – пленка и крупнозернистый осадок.

Mitis обр. мелкие, гладкие, блестящие, черные, полупрозрачные колонии с ровными краями. На жидкой – помутнение + порошкообразный осадок.

Б/х св-ва:

· Ферментация глюкозы и мальтозы с обр. кислоты,

· не разлагает сахарозу,

· не продуцирует уреазу и не обр. индол,

· продуцирует цистиназу,которая расщепляет цистеин, в следствие чего наблюдается почернение столбика агара.

Антигенные св-ва:

Вопрос №34. Характеристика возбудителей газовой анаэробной инфекции.

С. perfringens, С. novyi и С. Septicum.

С. peifringens — длинная грамположительная папочка .Имеет серовары А, В, С, D и F. В жидких питательных средах, приготовленных из гидролизатов мяса или казеина (pH 7,4). при 37—43 °С растет быстро (3—8 ч) с бурным газообразованием и изменением pH в кислую сторонуСуществует три устойчивых варианта колоний С. perfringens\ гладкий (S). слизистый (М) и шероховатый (R). Колонии, выросшие на поверхности кровяного агара, часто окружены одной или двумя зонами гемолиза и при выдерживании на воздухе приобретают зеленоватую окра ску. Многие штаммы вырабатывают ферменты, расплавляющие желатин. Все штаммы сбраживают с образованием кислоты и газа глюкозу, галактозу, мальтозу, лактозу, левулезу, сахарозу и не ферментируют маннит и дульцит. Некоторые штаммы разлагают глицерин и инулин.

С. septicum — полиморфная грамлоложительная палочка с суб- терминальными спорами. Строгий анаэроб. На поверхности плотных питательных сред только через 48 ч образует блестящие полупрозрачные колонии диаметром до 4 мм с неровными бахромчатыми краями, имеет тенденцию к ползучему росту. Чаще образует R-форму колоний. В глубине 1% агара образует колонии диаметром 1—2 мм с уплотненным центром и радиально отходящими перепутанными нитями. В 2% агаре колонии имеют вид чечевиц, сердца и т.п., иногда с протуберанцами. На кровяном агаре узкая зона гемолиза появляется вокруг колонии только на 2-е сутки. Ферментирует с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, лактозу, галактозу, фруктозу, салицин и не разлагает глицерин и маннит, разжижает желатин и свертывает лакмусовое молоко с образованием кислоты и газа. Очень редко разлагает сахарозу. Не образует индол, не восстанавливает нитраты в нитриты и не вырабатывает большого количества сероводорода.

Вопрос №35. Бактериологический метод исследования при дифтерии.

Исследуемый материал: дифтеритические пленку или отделяемое пораженной слизистой оболочки зева, носа, смывы с различных предметов, продукты питания ( молоко, мороженное)

1 день: Питательные среды:кровяно-теллуритовый агар,сывороточно-теллуритовая среда, Среда Бучина.

Материал втирают на поверхность среды тампотом. Термостат, Т= 37, 24 ч.

2 день: На средах с теллуритом: Gravis обр. плоские, крупные, серо-черные колонии с волнообразными краями.

Mitis обр. мелкие, гладкие, блестящие, черные, полупрозрачные колонии с ровными краями.

Среда Бучина: колонии синего цвета.

Окраска по Граму, Нейссеру.

ВЧК. Пересев на сывороточную среду в чашку с фосфатно-пептонным агаром. Термостат.

3 день: Учет результатов. ВЧК сеют на пестрый ряд, среду с цистеином.

4 день:Учет результатов.

Вопрос №36. Бактериологический метод исследования при газовой анаэробной инфекции.

Исследуемый материал: кусочки пораженных и некротизированных тканей. экссудат, гной, кровь, отделяемое ран.

1 день: исследуемый материал гомогенируют, посев на среду Китта- Тароцци ( или на др. среды с анаэробными условиями). В термостат.

2 день: учет результатов. Микроскопия. Мазок. Пересев на питательные среды.( возможно применение трубки Вейон — Виньяля. )Т=37, 24ч. Для ВЧК.

3 день: учет результатов. Микроскопия. Мазок.

На кровяных средах образуют зоны гемолиза. Колонии имеют тенденцию к сливному росту.

Пересев на среду Китта- Тароцци.

4 день: Учет результатов. Проверяют подвижность, устойчивость к кислороду, на отсутствие каталазной и оксидазной активности, способность ферментировать углеводы и разжижать желатин. Проводят реакцию нейтрализации.

Источник: http://megaobuchalka.ru/1/721.html

Дифтерия — инфекционное заболевание, вызываемое токсино продуцирующими штаммами Corynebacteriura diphtheriae, передающееся преимущественно воздушно-капельным путем, протекающее с поражением верхних отделов дыхательных путей, реже кожных покровов. Действие токсина приводит к дегенерации периферических нервов, сердечной мышцы и других тканей.

Клиническая диагностика манифестных форм дифтерии не представляет существенных сложностей. Однако у привитых лиц дифтерия может протекать в легкой форме или скрыто в виде бактерионосительства, что существенно затрудняет ее дифференциальную диагностику с другими инфекционно-воспалительными процессами респираторного тракта.

Решающее значение для подтверждения клинического диагноза дифтерии имеет лабораторная диагностика.

Возбудителем дифтерийной инфекции являются токсигенные Corynebacterium diphtheriae. Нетоксигенные коринебактерии дифтерии не вызывают дифтерийную инфекцию. «Этиологическая» значимость этих микроорганизмов при неинфекционной патологии (фарингит, артрит, эндокардит и др.) требует специальных доказательств. При выделении нетоксигенных штаммов C.diphtheriae от больных с подозрением на дифтерийную инфекцию следует обратить внимание на правильность проведения бактериологического исследования и оценку токсигенных свойств.

В основе способности C. diphtheriae вырабатывать экзотоксин лежит феномен фаговой (или лизогенной) конверсии. Конверсия нетоксигенных штаммов C. diphtheriae в токсигенные и наоборот воспроизводится только в экспериментальных условиях. В тех случаях, когда при первичном посеве исследуемого материала от больных дифтерией выделяют токсигенные, а при повторных обследованиях после лечения антибиотиками — нетоксигенные коринебактерии дифтерии, можно предположить, что при использовании антибиотиков в первую очередь исчезают токсигенные штаммы, как более чувствительные к их действию, а нетоксигенные штаммы продолжают выделяться. Такое же положение может создаваться и при санации антибиотиками бактерионосителей, одновременно выделяющих токсигенные и нетоксигенные коринебактерии дифтерии. Обнаружение у таких носителей при повторных обследованиях только нетоксигенных штаммов нельзя трактовать как утрату способности штаммов продуцировать экзотоксин.

Все микроорганизмы рода Corynebacterium являются грамположительными палочками, не образующими спор, обладающими различной степенью полиморфизма. Большинство видов лучше растет в аэробных условиях.

Обычно колонии микроорганизмов из рода коринебактерий на плотных питательных средах ( на кровяном агаре) имеют серовато — белую или желтоватую окраску, непрозрачные или полупрозрачные, округлой формы, диаметром 1-3 мм. Чаще всего они бывают мягкой, маслянистой консистенции, некоторые виды рода коринебактерии могут образовывать шероховатые R-колонии. Представители этого рода не отличаются высокой ферментативной активностью. C.diphtheriae растут при 37 град. C, устойчивы к низкой температуре, чувствительны к высокой. Все дезинфицирующие вещества в обычных концентрациях (3-5%) уничтожают коринебактерии дифтерии в течение 20-30 минут. Токсигенные C.diphtheriae более чувствительны к антибиотикам, чем нетоксигенные. Возможно появление устойчивых к антибиотикам штаммов.

Для C.diphtheriae характерен полиморфизм — разнообразие размеров и формы клеток. Клетки имеют форму булавы, ракетки, овода и т.д. Взаиморасположение клеток напоминает римские цифры X, V. При окраске часто обнаруживается выраженная внутриклеточная исчерченность, что объясняется наличием зерен волютина. Описано сродство волютина к метиленовому синему и, при обработке этим красителем, гранулы или полоски (скопления гранул) прокрашиваются в синий цвет, а протоплазма в отдельных случаях может приобрести розовый оттенок. Использование в бактериологической практике окраски по Граму является нецелесообразным, поскольку клетки C.diphtheriae легко обесцвечиваются спиртом и могут выглядеть в мазке грамвариабельными или даже грамотрицательными.

Для C.ulcerans и C.pseudodiphtheriticum характерна склонность к параллельному расположению клеток. 24-48-часовые культуры этих видов имеют чаще всего овоидную форму клеток.

По форме колоний и некоторым биохимическим свойствам C.diphtheriae подразделяют на культурально — биохимические варианты — gravis, mitis, intermedius.

Через 48-72 часа роста вариант mitis образует колонии S-типа — гладкие, диаметром 1-2 мм; S-R-колонии варианта gravis обычно выпуклые, с приподнятым центром, диаметром 2-3 мм; колонии варианта intermedius — S-типа, мелкие, плоские, гладкие, с ровным краем, диаметром 0,5-1 мм. Биовар intermedius встречается редко и по биохимическим свойствам не отличается от биовара mitis.

На кровяных теллуритовых средах через 48 часов роста колонии C.diphtheriae варианта gravis, как и колонии C.ulcerans, черные, матовые имеют радиальную исчерченность. Колонии C.pseudodiphtheriticum имеют характерный светлый ободок.

Определение токсигенных свойств проводится бактериологами в первые сутки роста подозрительных колоний на чашках первичного посева материала. Во избежание ошибок при определении токсигенных свойств коринебактерий, необходимо изучать данный признак у максимального числа выросших колоний с чашек первичного посева.

Ферментативная активность микроорганизмов изучается путем определения ферментов цистиназы, уреазы, способности расщеплять до кислоты глюкозу, сахарозу, крахмал. В редких случаях, когда необходимо идентифицировать C.ulcerans, добавляется тест на восстановление нитратов в нитриты.

ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ:  анализ на дифтерию

Учитывая, что при идентификации возбудителя дифтерийной инфекции ведущим элементом является определение наличия токсина, оценки других свойств имеет вспомогательное значение. В лабораториях, где проводится диагностика заболеваний, вызываемых «недифтерийными» коринебактериями, недостаточно использования даже «длинного» углеводного ряда. Для точной идентификации данных микроорганизмов необходимо использовать хемотаксономические методы исследования, например, такие, как определение наличия миколовых кислот в составе клеточной стенки бактерий и некоторые другие.

Таким образом, выделенный микроорганизм является возбудителем дифтерии, если он обладает токсигенными свойствами, определенным спектром ферментативной активности (расщепление глюкозы, крахмала, отсутствие разложения сахарозы, наличие фермента цистиназы, отсутствие фермента уреазы) и характерными морфолого — культуральными признаками (образование колоний черного или серого цвета на кровяно — теллуритовых средах, с учетом, при необходимости, морфологии клеток — полиморфные, не образующие спор палочки).

Источник: http://m.vuzlit.ru/918142/harakteristika_vozbuditelya_difteriynoy_infektsii

Дифтерия — острое инфекционное заболевание, которое в 17 веке называли петлей палача, т.к. нередко смерть наступала от задушения из-за образования в зеве пленки (dyphthera-пленка).

Возбудитель – Сorynebacterium dyphtheriae (coryne-булава). Относится к роду Сorynebacterium сем. Actinomycetaceae отд. Firmicutes. Возбудитель был открыт в 1883-1884г.г. Клебсом и Леффлером.

Морфология: тонкие, слегка изогнутые палочки, расположенные под углом, напоминал цифру V, на концах клетки имеются утолщения (как у булавы) — зерна волютина (полиметафосфаты), выполняющие функцию запасных питательных веществ. Наличие зерен волютинахарактерная черта дифтерийных палочек. Не образуют спор, не имеют жгутиков, у многих штаммов имеется микрокапсула.

^ Тинкториальные свойства: грам”+”; по Нейссеру клетки окрашиваются в желтый цвет, а зерна волютина — темно-синие.

Культуральные свойства: факультативные анаэробы; растут на специальных средах: свернутой сыворотке — среда Леффлера и на среде Клауберга, содержащей кровь и теллурит калия. На среде Клауберга вырастают колонии 3-х типов — gravis — крупные, серые, R-формы, mitis — круглые, черные и intermedius — промежуточные. Они отличаются, как культуральными, так и биохимическими свойствами.

^ Биохимические свойства: обладает высокой биохимической активностью; возбудитель дифтерии в отличие от других коринебактерий имеет цистиназу; С.d. биовар gravis ферментирует крахмал и гликоген в отличие от mitis. Антигенная структура: имеют Ои К-антигены, по которым различают 11 сероваров. Факторы патогенности: основной фактор патогенностиэкзотоксин, который вызывает поражение мышц сердца, надпочечников, почек, нервных клеток. Способность вырабатывать экзотоксин связана с наличием в клетке профага, несущего ген tох+, который отвечает за образование токсина. Такие штаммы возбудителя, имеющие профаг и вырабатывающие экзотоксин, называются токсигенными. Кроме экзотоксина возбудитель вырабатывает ферменты агрессии: гиалуронидазу, нейраминидазу, корд-фактор. Резистентность: дифтерийные палочки устойчивы к высушиванию, низкой температуре. На детских игрушках может сохраняться до 15 дней, в воде — 6 — 20 дней.

Источником инфекции являются больные люди и носители. Наибольшее количество возбудителя выделяют в окружающую среду больные с ярко выраженной формой. Опасными источниками являются также больные с атипичными формами.

Пути передачи: ^ 1) воздушно-капельныйосновной путь передачи;

2) контактно-бытовой — через белье, посуду, игрушки.

Восприимчивость к дифтерии высокая. Наиболее чувствительны дети. В последствие годы отмечается “повзросление” дифтерии. Заболевание чаще встречается осенью.

Патогенез и клиника. Входные ворота — слизистые оболочки зева, носа, дыхательных путей. ^ В патогенезе ведущую роль играет экзотоксин. Дифтериятоксинемическая инфекция. На месте внедрения возбудителя (чаще всего — зев) под действием экзотоксина образуется фибринозная пленка серого цвета, которая с трудом отделяется от близлежащих тканей. Экзотоксин, выделяемый бактериями, поступает в кровь и поражает сердце, почки, надпочечники, нервную систему. Экзотоксин, проникая в клетки, блокирует ферменты синтеза белка, что приводит к гибели клетки. Дифтерийные палочки могут поражать раны, глаза, половые органы, нос. В 85-90% случаев наблюдается дифтерия зева.

^ Инкубационный период 2-7 дней. Заболевание начинается с повышения температуры, болей в горле, пленки на миндалинах, увеличения лимфатических узлов, головной боли. У взрослых дифтерия может протекать как лакунарная ангина. У детей раннего возраста в патологический процесс одновременно может вовлекаться гортань, и в результате отека гортани развивается дифтерийный круп, который может привести к асфиксии (удушению) и смерти. Причиной смерти также может быть токсический миокардит, острая недостаточность гипофизарно-надпочечниковой системы, паралич дыхательных мышц.

^ Иммунитет. После заболевания вырабатывается стойкий антитоксический иммунитет, который можно выявить при помощи реакции Шика.

Исследуемый материал: налет и слизь из зева который берут стерильным ватным тампоном.

^ Методы диагностики: 1) бактериоскопический — приготовление и окраска мазка; этот метод используется для постановки предварительного диагноза;

2) бактериологическийосновной метод: посев и выделение чистой культуры; при идентификации чистой культуры важно отличить возбудителя дифтерии от других коринебактерий; для этого исследуют способность образовывать экзотоксин при помощи реакции преципитации в геле по Оухтерлони (выделенную чистую культуру засевают в чашку Петри рядом с полоской бумаги, которая пропитана противодифтерийной антитоксической сывороткой; если культура токсигенна (образует экзотоксин), то в месте встречи экзотоксина и сыворотки, которые диффундируют в агар, образуются линии преципитации белого цвета).

Лечение.
Основной метод лечения — немедленное введение антитоксической противодифтерийной сыворотки, действие которой направлено на нейтрализацию экзотоксина. Применяют также антибиотики: тетрациклин, эритромицин. Обязательно лечение носителей токсигенных штаммов при помощи антибиотиков.

Профилактика.
Общая профилактика — ранняя диагностика, госпитализация, тщательная дезинфекция, лечение носителей. ^ Специфическая профилактика — использование вакцин АКДС, АДС-М, в состав которых входит дифтерийный анатоксин. Иммунизируют с 3-х месяцев. В 2 года, 9 лет и 16 лет и далее через каждые 10 лет делают ревакцинацию с помощью АДС-анатоксина. При контакте с больным человеком людям, не имеющим антитоксического иммунитета. Вводят дифтерийный анатоксин. Для иммунизации людей, склонных к аллергии, выпускаются вакцины АКДС-М, АДС-М, АД-М, содержащие малое количество антигена.

ВОЗБУДИТЕЛИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ИНФЕКЦИЙ: СКАРЛАТИНЫ, МЕНИНГОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ, КОКЛЮША.

Скарлатина — инфекционная болезнь, сопровождающаяся общей интоксикацией и харак­терной ярко-красной сыпью. Scarlatto — красный (итал.). Впервые в 1902 г. Габричевский высказал предположение о стрептококковой природе скарлатины.

Возбудитель — Streptococcus pyogenes относится к отделу Streptococcaceae, род Streptococcus. К этому роду относится 21 вид. Streptococcus progenies также является возбудите­лем других заболеваний человека (рожистое воспаление, ангина, эндокардит, ревматизм, гломерулонефрит, хронические тонзиллиты, фарингиты, остеомиелиты), проникая внутрь организма может вызвать сепсис и септикопиемию.

Морфология: мелкие круглые клетки — кокки, расположенные в цепочку, без спор, жгути­ков, образуют капсулу из гиалуроновой кислоты. Легко переходят в L-формы.

^ Тинкториальные свойства: грам»+».

Культуральные свойства: факультативные анаэробы, но есть и анаэробы, требовательны к питательным средам. Для выращивания используют сахарные, сывороточные среды, кровяной агар. Колонии мелкие, в диаметре до 1 мм, серые или бесцветные, чаще слизистые. На жидких сре­дах растут в виде осадка.

На кровяном агаре могут давать α-гемолиз (зеленящий) и β-гемолиз (полный).

^ Биохимические свойства: разлагают сахара сред Гисса (лактозу, сахарозу, глюкозу) до кисоты, не разжижает желатин.

Антигенная структура: имеют полисахаридный антиген («субстанция С»). По полисахаридному антигену стрептококки подразделяются на 17 серогрупп — A, B,C. S. Стрептококки группы А имеют белковые антигены — М и Т. М-антиген строго специфичен и определяет принадлежность к серовару. Т-антиген может быть общим у разных сероваров. Принадлежность к серогуппе устанавливают при помощи реакции преципитации с групповыми иммунными сыво­ротками, а к серовару — с типоспецифическими иммунными сыворотками. Т-антиген определяют при помощи реакции агглютинации.

М-антиген определяет вирулентность стрептококков, т.к. подавляет фагоцитоз.

^ Факторы патогенности: Стрептококки группы А выделяют около 20 внеклеточных фак­торов патогенности, которые обладают антигенной активностью. К ним относятся: 1) экзоток­сины: гемолизин (о-стрептолизин), лейкоцидин, некротоксин, эритрогенин (вызывает расшире­ние мелких кровеносных сосудов кожи); эритрогенин выделяют β -гемолитические стрепто­кокки группы А, которые и являются возбудителями скарлатины; 2) ферменты агрессии: стрептокиназа (фибринолизин), ДНКаза, гиалуронидаза.

Эритрогенин используется для постановки реакции Дика при диагностике скарлатины (для выявления антитоксического иммунитета).

ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ:  дифтерия в украине

Резистентность: относительно устойчивы во внешней среде, особенно к низкой темпера­туре. Хорошо переносят высушивание (месяцами сохраняют жизнеспособность в высохшем гное и мокроте). Погибают при пастеризации при 56°С через 30 мин. Устойчивость к антибиотикам вы­рабатывается медленно.

Источник инфекции: только человек — больной (с начала заболевания вплоть до 4-5 дней после исчезновения клинических симптомов) или носитель патогенных стрептококков. Механизм передачи: аэрогенный. Пути передачи:

воздушно-капельный — основной путь передачи инфекции;

контактно-бытовой — через белье, предметы обихода, игрушки; возможна передача через третьи лица, которые соприкасались с больным.

Восприимчивость к скарлатине всеобщая и зависит от возраста и напряженности антиток­сического иммунитета. Перенесенное заболевание оставляет очень стойкий иммунитет. Поэтому взрослые, как правило, не болеют. Наиболее восприимчивы к скарлатине дети в возрасте от 1 до 8 лет. Большинство случаев заболевания приходится на осенне-зимний период (скученность людей в помещениях, например, детей в детсадах и школах). Встречаются как единичные (спора­дические) случаи, так и вспышки, эпидемии болезни.

Патогенез и клиника заболевания.

Входные ворота: слизистая оболочка зева и носоглотки (реже — поврежденная кожа).

Скарлатина — это токсико-септическое заболевание. Первичное размножение — в минда­линах и носоглотке, где развивается скарлатинозная ангина и подчелюстной лимфаденит, т.к. микробы проникают в регионарные лимфатические узлы. При размножении микробы образуют экзотоксины — эритрогенин и др., которые поступают в кровь и вызывают общую интоксикацию. В кровь поступают также и аллергены стрептококка. Это приводит к развитию нефритов, артри­тов, лимфаденитов. Тяжелые формы и осложнения скарлатины связаны с токсическим воздейст­вием и развитием аллергии.

Икубационный период продолжается 1-12 дней, в среднем 4-5 дней. Заболевание сопро­вождается лихорадкой, ангиной (нередко некротической), увеличением лимфатических уз­лов и мелкоточечной сыпью на теле.

Типичная форма скарлатины начинается остро: после незначительного озноба температура тела в течение 6-7 ч. повышается до 40°С. У маленьких детей при этом нередко появляется однократная или повторная рвота. Больные жалуются на головную боль, недомогание, болезненность при глотании, дети отказываются от пищи, капризничают.

В конце 1-х суток или реже на 2-ой — 3-ий день появляется сыпь вначале в верхней части груди, а затем по всему телу. Сыпь состоит из мелкоточечных элементов, густо (близко) располо­женных один около другого и образующих на коже сплошное насыщенное розовое поле. Сыпь появляется в результате действия на мелкие кровеносные сосуды токсина — эритрогенина. Ли­цо больного слегка одутловато (опухшее), щеки ярко гиперемированы (красные), тогда как возле носа и рта кожа бледная (скарлатинозный треугольник). В зеве отмечается разлитая (сплошная) гиперемия мягкого неба, язычка, миндалин, наличие грязно-серого налета. У некоторых больных увеличиваются регинарные подчелюстные лимфатические узлы. С 3-4 дня серый налет исчезает и тогда можно видеть, что язык стал ярко-красным (малиновый язык). Температура дер­жится в течение 3-6 дней, затем снижается и приходит в норму на 9-10 день болезни. Одновремен­но улучшается общее состояние больного, уменьшается интоксикация, исчезает сыпь и другие симптомы.

В настоящее время на фоне лечения пенициллином в 80-90% случаев скарлатина протекает легче, но увеличиваются случаи повторного заболевания (8-10%). Но в типичных случаях скарла­тина может давать осложнения: гнойный лимфаденит, нефрит, миокардит.

Иммунитет. После скарлатины остается стойкий антитоксический иммунитет. При доста­точной напряженности иммунитета повторное заболевание скарлатиной не возникает.

Диагноз ставят в основном на основании клинических и эпидемиологических данных. Ла­бораторная диагностика используется для подтверждения диагноза.

Исследуемый материал: мазок из зева.

1) бактериологический — материал из зева засевают на кровяной агар и выделяют чистую культуру. Наличие характерного вида колоний и грамположительных цепочек кокков в мазке дает возможность сделать вывод об обнаружении стрептококков. У выделенной чистой культуры оп­ределяют серогруппу, серовар.

2) серологический — обнаружение антител в сыворотке крови больного к О-стрептолизину.

реакция Дика — внутрикожная проба на наличие антитоксического иммунитета

(1/40 часть DLM скарлатинозного токсина — эритрогенина вводят внутрикожно в левую руку, в правую для контроля вводят токсин, разрушенный кипячением. Если у ребенка есть иммунитет, то на месте введенного нативного (не разрушенного кипячением) токсина реакция будет отрицательной, т. е. в организме есть антитела — антитоксины, кото­рые нейтрализовали введенный токсин. Если реакция на токсин будет положительная (отечность, покраснение), то иммунитета нет и ребенок восприимчив к скарлатине). В последние годы внутрикожные пробы ставить не рекомендуется.

Применяют антибиотики, в основном — пенициллин. При тяжелых формах сочетают пени­циллин с другими антибиотиками, проводят дезинтоксикацию (вводят 5% раствор глюкозы, физ.раствор), назначают сердечные средства, витамины.

Специфическая профилактика не разработана. Неспецифическая профилактика — ран­нее выявление и изоляция источника инфекции. Больных изолируют от 10 до 22 дней. Для лиц, бывших в контакте с больным, устанавливают карантин сроком до 7 дней.

Коклюш — инфекционная болезнь, сопровождающаяся приступами спазматического кашля. Наблюдается преимущественно у детей дошкольного возраста.

Возбудитель — Bordetella pertussis — был открыт в 1906 г. Борде и Жангу. Возбудитель кок­люша относится к отделу Gracilicutes, роду Bordetella.

Морфология: мелкие овоидные палочки, с закругленными концами, спор и жгутиков не имеет, образует микрокапсулу.

Тинкториальные свойства: грам «-«,

Культуральные свойства: строгий аэроб, очень требователен к питательным средам, рас­тет на среде Борде-Жангу (картофельно-глицериновом агаре с добавлением крови), колонии по­хожи на капельки ртути.

^ Ферментативная активность: не активны.

Антигенные свойства: по О-антигену делится на серовары (1, 2, 3 и тд.)

Токсинообразование: имеет эндотоксин, вызывающий лихорадку, белковый токсин, об­ладающий антифагоцитарной активностью. В адгезии бактерий принимают участие гемагглютинин, пили, белки наружной мембраны.

Резистентность: возбудитель коклюша очень устойчив в окружающей среде.

Восприимчивость для животных: при интраназальном заражении мышей у них развива­ется пневмония.

Коклюш — антропонозное заболевание.

Источником инфекции является больной, находящийся в ранней (катаральной) фазе забо­левания и носители.

Путь передачи — воздушно-капельный.

Коклюш чаще поражает детей, особенно в грудном возрасте и от 2-х до 4-х лет. Близкий контакт, скученность способствует распространению инфекции. Наблюдаются как спорадические (единичные случаи), так и вспышки заболевания. Осенью и зимой наблюдается повышение забо­леваемости. Заболевание встречается и среди взрослых.

Входными воротами являются верхние дыхательные пути, где развивается катаральное воспаление. В результате постоянного раздражения токсином рецепторов дыхательных путей по­является кашель, в дальнейшем в дыхательном центре образуется очаг возбуждения и приступы судорожного кашля могут быть вызваны и неспецифическими раздражителями. В возникновении приступов кашля имеет значение сенсибилизация организма токсинами возбудителя.

Инкубационный период от 2-х до 14-и дней. Заболевание начинается с общей слабости, недомогания, осиплости голоса, насморка и кашля. Катаральные явления нарастают в течение 4-5 дней. Сухой кашель с большим количеством сухих хрипов в легких наряду с небольшим повыше­нием температуры может отмечаться в течение 10 дней и более. Позднее развивается судорожная стадия болезни: приступы кашля сопровождаются задержкой дыхания, возникает несколько судо­рожных кашлевых толчков. После этого в дыхании наступает короткая пауза и глубокий вздох, затем возникает приступ мучительного судорожного кашля, лицо больного становится отечным, гиперемированным, иногда с синюшным оттенком. Таких приступов может быть от 5 до 50 в су­тки. При кашле бывает выделение мокроты. Судорожный кашель иногда приводит к кровоизлия­нию в склеры, носовым кровотечениям. Заболевание продолжается до 2-х месяцев. Различают лег­кую, средне-тяжелую и тяжелую формы коклюша. Приступы кашля исчезают к началу 5-6-ой не­дели болезни. Течение болезни может осложниться развитием пневмонии, принимающей обычно затяжное течение.

Иммунитет. После перенесенного заболевания вырабатывается стойкий иммунитет, кото­рый сохраняется всю жизнь.

Исследуемый материал — слизь из зева.

Основной метод — бактериологический.

Для ретроспективной диагностики применяют серологический метод (РА, РСК, РНГА).

Антибиотики, нормальный иммуноглобулин, антигистаминные препараты, холодный све­жий воздух.

Спецпрофилактика: иммунизация вакциной АКДС и АКДС-М. Вводят эти вакцины детям с 4-х месяцев. Детям до 1-го года и не привитым людям, при контакте с больным, вводят нормаль­ный человеческий иммуноглобулин.

Источник: http://userdocs.ru/biolog/57275/index.html?page=29

Ссылка на основную публикацию