морфология дифтерии

Äèôòåðèÿ — îñòðàÿ èíôåêöèîííàÿ áîëåçíü, âûçûâàåìàÿ òîêñèãåííûìè êîðèíåáàêòåðèÿìè äèôòåðèè. Ïåðåäàåòñÿ âîçäóøíî-êàïåëüíûì ïóòåì, õàðàêòåðèçóåòñÿ ìåñòíûì ôèáðîçíûì âîñïàëåíè­åì ïðåèìóùåñòâåííî ñëèçèñòûõ îáîëî÷åê ðòà è íîñîãëîòêè, ÿâëåíè­ÿìè îáùåé èíòîêñèêàöèè è ïîðàæåíèåì ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòîé, íåðâíîé è âûäåëèòåëüíîé ñèñòåì. Ïîâðåæäàþùåå äåéñòâèå íà îðãàíû è òêà­íè îáóñëîâëåíî òîêñèíîì, âûäåëÿåìûì âîçáóäèòåëåì â ìåñòå åãî ëî­êàëèçàöèè.

Âîçáóäèòåëü äèôòåðèè îòíîñèòñÿ ê âèäó Ñîãónebacterium diphtheriae ðîäà Ñîãónebacterium, ñåìåéñòâó Actinomyceae.

Ìîðôîëîãèÿ. Îòëè÷èòåëüíîé îñîáåííîñòüþ Ñ. diphtheriae ÿâ­ëÿåòñÿ ïîëèìîðôèçì, ïðîÿâëÿþùèéñÿ â ìíîãîîáðàçèè ôîðì êëå­òîê.  êóëüòóðå îäíîãî è òîãî æå øòàììà íàðÿäó ñ òèïè÷íûìè äëèííûìè èçîãíóòûìè ïàëî÷êàìè ìîæíî îáíàðóæèòü êîðîò­êèå, òîëñòûå, ñî âçäóòèÿìè íà êîíöàõ, ïðèäàþùèìè èì ñõîäñòâî ñ áóëàâîé. Ðàçìåðû âàðüèðóþò îò 1 äî 6 ìêì ïî äëèíå è îò 0,3 äî 0,8 ìêì â äèàìåòðå. Äëÿ äèôòåðèéíûõ áàêòåðèé õàðàêòåðíî íå­ðàâíîìåðíîå îêðàøèâàíèå êëåòîê áëàãîäàðÿ íàëè÷èþ â íèõ çåðåí âîëþòèíà, êîòîðûå âîñïðèíèìàþò ëþáîé àíèëèíîâûé êðàñèòåëü èíòåíñèâíåå, ÷åì ïðîòîïëàçìà, âñëåäñòâèå ÷åãî ïðè îêðàñêå ïî Ëåôôëåðó èëè Íåéññåðó âûÿâëÿþòñÿ â âèäå ãðàíóë ñîîòâåòñòâåí­íî òåìíî-ñèíåãî èëè ñèíå-÷åðíîãî öâåòà. Ýòè ãðàíóëû ðàñïîëàãà­þòñÿ ÷àùå âñåãî â áóëàâîâèäíûõ óòîëùåíèÿõ íà îáåèõ êîíöàõ êîðèíåáàêòåðèé.

Âîçáóäèòåëè äèôòåðèè â ìàçêàõ ÷àñòî ðàñïîëàãàþòñÿ ïîïàð­íî, ïîä îñòðûì óãëîì îäèí ê äðóãîìó, ÷òî îáúÿñíÿåòñÿ ñâîåîáðàç­íûì òèïîì äåëåíèÿ êëåòîê ïóòåì èçëîìà («ùåëêàþùèé òèï» äå­ëåíèÿ), â îòëè÷èå îò íåïàòîãåííûõ êîðèíåáàêòåðèé, äëÿ êîòîðûõ õàðàêòåðíî ïàðàëëåëüíîå ðàñïîëîæåíèå â ìàçêå.

Íå îáðàçóþò ñïîð, êàïñóë, æãóòèêîâ.

Êóëüòóðàëüíûå ñâîéñòâà. Âîçáóäèòåëü äèôòåðèè — àýðîá èëè ôàêóëüòàòèâíûé àíàýðîá, îïòèìàëüíàÿ òåìïåðàòóðà ðîñòà — 37 0 Ñ;

ãåòåðîòðîô, òî åñòü îòíîñèòñÿ ê ãðóïïå áàêòåðèé, òðåáóþùèõ äëÿ ñâîåãî ðîñòà îðãàíè÷åñêèå âåùåñòâà. Èñïîëüçóåìûå äëÿ âûðà­ùèâàíèÿ ñðåäû äîëæíû ñîäåðæàòü â êà÷åñòâå èñòî÷íèêà óãëåðîäà è àçîòà àìèíîêèñëîòû — àëàíèí, öèñòèí, ìåòèîíèí è äð.  ñâÿ­çè ñ ýòèì ñåëåêòèâíûìè ñðåäàìè äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ ÿâëÿþòñÿ òå, êîòîðûå ñîäåðæàò æèâîòíûé áåëîê: êðîâü, ñûâîðîòêó, àñöèòè÷åñêóþ æèäêîñòü. Íà îñíîâàíèè ýòîãî è áûëà ñîçäàíà êëàññè÷åñ­êàÿ ñðåäà Ëåôôëåðà, à çàòåì ñðåäû Êëàóáåðãà è Òèíäàëÿ.

Ïî êóëüòóðàëüíûì è áèîëîãè÷åñêèì ñâîéñòâàì êîðèíåáàêòå­ðèé äèôòåðèè ïîäðàçäåëÿþòñÿ íà òðè áèîâàðà: gravis, mitis, intermedius, êîòîðûå îòëè÷àþòñÿ ðÿäîì ïðèçíàêîâ. Íàèáîëåå ÷åòêî äèô­ôåðåíöèàöèþ òèïîâ ìîæíî ïðîâåñòè ïî ôîðìå êîëîíèé ïðè âûðàùèâàíèè êóëüòóðû íà êðîâÿíîì àãàðå ñ äîáàâëåíèåì òåëëóðèòà.

Êîëîíèè òèïà gravis ÷åðåç 48—72 ÷àñà äîñòèãàþò â äèàìåòðå 1—2 ìì, èìåþò âîëíèñòûå êðàÿ, ðàäèàëüíóþ èñ÷åð÷åííîñòü è ïëîñ­êèé öåíòð (R-ôîðìà) ÷åðíîãî èëè ñåðîãî öâåòà. Ïðè ðîñòå íà áóëüîíå êóëüòóðû òèïà gravis îáðàçóþò íà ïîâåðõíîñòè êðîøàùó­þñÿ ïëåíêó. Íà ñðåäàõ Ãèññà ñ äîáàâëåíèåì ñûâîðîòêè îíè ðàñ­ùåïëÿþò ïîëèñàõàðèäû — êðàõìàë, äåêñòðèí, ãëèêîãåí ñ îáðàçî­âàíèåì êèñëîòû. Òîêñèãåííûå øòàììû êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè îòíîñÿòñÿ ê ýòîìó áèîâàðó.

Êóëüòóðû òèïà mitis íà êðîâÿíîì àãàðå ñ òåëëóðèòîì âûðàñòà­þò â êðóïíûå, ñëåãêà âûïóêëûå, ñ ðîâíûì êðàåì, ÷åðíûå ìàòîâûå êîëîíèè (S-ôîðìà). Ïðè ðîñòå íà áóëüîíå äàþò ðàâíîìåðíóþ ìóòü è îñàäîê. Êðàõìàë, äåêñòðèí è ãëèêîãåí íå ðàñùåïëÿþò. Êóëüòó­ðû ýòîãî òèïà, êàê ïðàâèëî, ìåíåå òîêñèãåííû è èíâàçèîííû, ÷åì êîðèíåáàêòåðèé áèîâàðà gravis.

Êîðèíåáàêòåðèé áèîâàðà intermedius çàíèìàþò ïðîìåæóòî÷íîå ïîëîæåíèå. Êîëîíèè, âûðàùåííûå íà òåëëóðèòîâîì àãàðå, ìåëêèå (RS-ôîðìà), ÷åðíîãî öâåòà, íå ôåðìåíòèðóþò êðàõìàë è ãëèêîãåí, â áóëüîíå ðàñòóò ñ ïîÿâëåíèåì ìóòè è çåðíèñòîãî îñàäêà.

Àíòèãåííàÿ ñòðóêòóðà. Êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè õàðàêòåðè­çóþòñÿ ñëîæíîé àíòèãåííîé ñòðóêòóðîé è ìíîãîîáðàçèåì ñåðîëî­ãè÷åñêèõ ñâîéñòâ.  ðåàêöèè àããëþòèíàöèè âûÿâëÿþòñÿ áåëêîâûå òåðìîëàáèëüíûå R-àíòèãåíû òîêñèíîñïåöèôè÷åñêîé ïðèðîäû, ëîêàëèçîâàííûå â ïîâåðõíîñòíîì ñëîå êëåòî÷íîé ñòåíêè, O-àíòèãåí — òèïîñïåöèôè÷åñêèé.

Ñðåäè êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè èìååòñÿ 19 ôàãîòèïîâ, ñ ïî­ìîùüþ êîòîðûõ âûÿâëÿþò èñòî÷íèêè èíôåêöèè; ó÷èòûâàþòñÿ îíè è ïðè èäåíòèôèêàöèè âûäåëåííûõ êóëüòóð.

Ñåðîëîãè÷åñêèå ñâîéñòâà ëó÷øå âñåãî èçó÷åíû ó øòàììîâ âà­ðèàíòà gravis. Åãî òîêñèãåííûå øòàììû ïîäðàçäåëåíû íà ïÿòü — äåâÿòü ñåðîâàðîâ. Ðàñïðåäåëåíèå ïîñëåäíèõ íà ðàçëè÷íûõ òåððè­òîðèÿõ íå ÿâëÿåòñÿ îäèíàêîâûì, íà îäíîé è òîé æå òåððèòîðèè ìîæåò öèðêóëèðîâàòü íåñêîëüêî ñåðîâàðîâ, íî ñðåäè íèõ ïðåîá­ëàäàåò êàêîé-íèáóäü îäèí.

Ôàêòîðû ïàòîãåííîñòè. Äèôòåðèéíûå êîðèíåáàêòåðèé ïðî­äóöèðóþò â áóëüîííûõ êóëüòóðàõ ñèëüíûå ýêçîòîêñèíû (ãèñòîòîêñèí, äåðìîíåêðîòîêñèí, ãåìîëèçèí). Òîêñèíîãåíåç êîðèíåáàê­òåðèé äèôòåðèè äåòåðìèíèðóåòñÿ ãåíîì, ñîäåðæàùèìñÿ â ïðîôàãå, ñëåäîâàòåëüíî, îñíîâíîå ñðåäñòâî àãðåññèè — òîêñèíîîáðàçîâàíèå, íå ñâÿçàíî ñ õðîìîñîìîé áàêòåðèé. Îñîáåííîñòü òîêñèíîîáðàçîâàíèÿ äèôòåðèéíîé ïàëî÷êè îïðåäåëÿåòñÿ íàëè÷èåì åå â ÄÍÊ ñïåöèôè÷åñêîãî ïðîôàãà, ñîäåðæàùåãî ñòðóêòóðíûé ãåí òîêñè÷­íîñòè, êîòîðûé îáîçíà÷àåòñÿ êàê ÒÎÕ*. Òàêèì îáðàçîì, íå èíôè­öèðîâàííàÿ ñïåöèôè÷åñêèì ôàãîì äèôòåðèéíàÿ ïàëî÷êà íå ñïî­ñîáíà ê òîêñèíîîáðàçîâàíèþ. Ïðè åå èíôèöèðîâàíèè ïðîôàãîì ïðîèñõîäèò ïðèñîåäèíåíèå ÒÎX + ê ÄÍÊ ìèêðîáíîé êëåòêè.  ñâÿçè ñ òåì, ÷òî äèôòåðèéíàÿ ïàëî÷êà ñïîñîáíà êîíòðîëèðîâàòü ïðîôàã, ýôôåêò ëèçîãåíèè ðåàëèçóåòñÿ ëèøü ïðè ôèçèîëîãè÷åñêîì ñòàðåíèè èëè èíãèáèöèè îñíîâíûõ ïðîöåññîâ æèçíåäåÿòåëüíîñòè ìèêðîáíîé êëåòêè, êîãäà ïðîôàã âûõîäèò èç-ïîä êîíòðîëÿ è îáåñ­ïå÷èâàåò âûðàæåííóþ ôàãîâóþ ðåïðîäóêöèþ.

 îñíîâå òîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ äèôòåðèéíîãî òîêñèíà ëå­æèò ñïîñîáíîñòü ïîäàâëÿòü áèîñèíòåç êëåòî÷íîãî áåëêà, ÷òî ðàññìàòðèâàåòñÿ êàê îñíîâíàÿ ïðè÷èíà ãèáåëè êëåòîê è ñìåðòè îð­ãàíèçìà îò äèôòåðèéíîé èíôåêöèè. Äèôòåðèéíûé òîêñèí îòíî­ñèòñÿ ê ñèëüíîäåéñòâóþùèì áàêòåðèàëüíûì òîêñèíàì è óñòóïàåò òîëüêî áîòóëèíè÷åñêîìó è ñòîëáíÿ÷íîìó. Ìîëåêóëà òîêñèíà ñî­ñòîèò èç äâóõ ôðàãìåíòîâ, îäèí èç êîòîðûõ òåðìîñòàáèëåí è îá­ëàäàåò ôåðìåíòàòèâíîé àêòèâíîñòüþ, âòîðîé — òåðìîëàáèëåí è âûïîëíÿåò ïðîòåêòèâíóþ ôóíêöèþ. Ïîñëå äîáàâëåíèÿ ê òîêñè­íó 0,3—0,4 %-íîãî ðàñòâîðà ôîðìàëèíà è ïîñëåäóþùåãî âûäåð­æèâàíèÿ ïðè 38°Ñ â òå÷åíèå òðåõ-÷åòûðåõ íåäåëü ïðîèñõîäèò ïðåâðàùåíèå åãî â àíàòîêñèí, èñïîëüçóåìûé äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ïðîôèëàêòè÷åñêîãî ïðåïàðàòà.

 ïðîöåññå æèçíåäåÿòåëüíîñòè äèôòåðèéíûå áàêòåðèè ïðî­äóöèðóþò, êðîìå òîêñèíà, íåéðàìèíèäàçó, ãèàëóðîíèäàçó, íåêðî-òèçèðóþùèé è äèôôóçèîííûé ôàêòîðû.

Ðåçèñòåíòíîñòü. Äèôòåðèéíûå áàêòåðèè îáëàäàþò çíà÷èòåëü­íîé óñòîé÷èâîñòüþ ê âîçäåéñòâèþ ôàêòîðîâ îêðóæàþùåé ñðåäû  äèôòåðèéíîé ïëåíêå, êàïåëüêàõ ñðåäû, ïðèëèïøèõ ê ñòåíêå ñòàêàíà, íà ðó÷êàõ äâåðåé, äåòñêèõ èãðóøêàõ îíè ìîãóò ñîõða-

íÿòüñÿ äî 15 äíåé, â âîäå è ìîëîêå — äî 20. Âûæèâàåìîñòü íà ïðåäìåòàõ îêðóæàþùåé ñðåäû â îñåííå-âåñåííèé ïåðèîä äîñòè­ãàåò 5,5 ìåñÿöà è íå ñîïðîâîæäàåòñÿ óòðàòîé èëè îñëàáëåíèåì èõ ïàòîãåííûõ ñâîéñòâ. Ê ÷èñëó íåáëàãîïðèÿòíûõ ôàêòîðîâ îòíî­ñÿòñÿ ïðÿìûå ñîëíå÷íûå ëó÷è, âûñîêàÿ òåìïåðàòóðà, õèìè÷åñêèå àãåíòû. Ïðè êèïÿ÷åíèè è â àëêîãîëå äèôòåðèéíûå áàêòåðèè ïî­ãèáàþò â òå÷åíèå 1 ìèíóòû, â 10 %-íîì ðàñòâîðå ïåðåêèñè âîäî­ðîäà — ÷åðåç òðè.

Ýïèäåìèîëîãèÿ. Èñòî÷íèêîì äèôòåðèè ÿâëÿåòñÿ ÷åëîâåê, ó êî­òîðîãî îíà ïðîÿâëÿåòñÿ â ðàçíûõ êëèíè÷åñêèõ ôîðìàõ — îò òÿæåëûõ òîêñè÷åñêèõ äî ñòåðòûõ ôîðì è çäîðîâîãî áàêòåðèîíîñèòåëüñòâà.

Ýïèäåìèîëîãè÷åñêîå çíà÷åíèå è ðîëü èñòî÷íèêà èíôåêöèè â ðåàëèçàöèè ìåõàíèçìà çàðàæåíèÿ îïðåäåëÿåòñÿ ãëàâíûì îáðà­çîì èíòåíñèâíîñòüþ ïåðåäà÷è èíôåêöèîííîãî íà÷àëà (âîçáóäè­òåëÿ). Åñòåñòâåííî, ÷åì áîëüøå îáñåìåíåííîñòü ñëèçèñòûõ îáî­ëî÷åê âåðõíèõ äûõàòåëüíûõ ïóòåé, òåì âåðîÿòíåå âîçìîæíîñòü âûáðîñà âîçáóäèòåëÿ â ìàññîâûõ äîçàõ â îêðóæàþùóþ ñðåäó ïðè ðàçãîâîðå, êàøëå, ÷èõàíèè. Íàèáîëåå îïàñíû â ýòîì îòíîøåíèè áîëüíûå äèôòåðèåé è áàêòåðèîíîñèòåëè. Ïëîòíîñòü çàñåëåíèÿ ñëèçèñòûõ îáîëî÷åê êîðèíåáàêòåðèÿìè äèôòåðèè ðåçêî âîçðàñòà­åò ó ëþäåé ñ âîñïàëèòåëüíûìè çàáîëåâàíèÿìè âåðõíèõ äûõàòåëü­íûõ ïóòåé, àíãèíàìè, òóáåðêóëåçîì. Ðàñïðîñòðàíåííîñòü áàêòåðèîíîñèòåëüñòâà êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè âàðüèðóåò îò 0 äî 60 %, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î âëèÿíèè ñîñòîÿíèÿ îðãàíèçìà íà ïðîöåññ íîñèòåëüñòâà.

Ïàòîãåíåç. Íàèáîëüøóþ çàáîëåâàåìîñòü äèôòåðèåé îòìå÷à­þò îñåíüþ, ÷òî îáúÿñíÿåòñÿ óâåëè÷åíèåì ñêó÷åííîñòè íàñåëåíèÿ â ýòî âðåìÿ ãîäà è ñíèæåíèåì ñîïðîòèâëÿåìîñòè îðãàíèçìà ïîä âëèÿíèåì îõëàæäåíèÿ.

Âîñïðèèì÷èâîñòü ê äèôòåðèéíîé èíôåêöèè, ðàçâèòèå áîëåç­íè îáóñëîâëåíû ðÿäîì ôàêòîðîâ, îñíîâíûìè èç êîòîðûõ íàäî ñ÷èòàòü èììóíîëîãè÷åñêîå ñîñòîÿíèå îðãàíèçìà, âîçðàñò, ðåçèñòåíòíîñòü òêàíåé â ìåñòå âíåäðåíèÿ âîçáóäèòåëÿ, ñîñòîÿíèå íåðâ­íîé ñèñòåìû è îáùåé ðåàêòèâíîñòè.

Ðåàêöèÿ îðãàíèçìà íà âíåäðåíèå áàêòåðèé áûâàåò ìåñòíîé è îáùåé, ñòåïåíü è õàðàêòåð åå çàâèñÿò â îñíîâíîì îò çàùèòíûõ ñèë îðãàíèçìà. Ìåñòíàÿ ðåàêöèÿ ïðîÿâëÿåòñÿ â òî÷êå âíåä­ðåíèÿ ìèêðîáà. Ïðåæäå ÷åì íà÷èíàåò äåéñòâîâàòü òîêñèí, âîçáó­äèòåëü äîëæåí ïðîéòè ñòàäèþ ïðèæèâëåíèÿ è ðàçìíîæåíèÿ íà ñëèçèñòîé îáîëî÷êå ðîòî- è íîñîãëîòêè èëè êîæå. Ïîïàâ íà áëà­ãîïðèÿòíóþ ïî÷âó, âîçáóäèòåëü ðàçìíîæàåòñÿ, âûðàáàòûâàåò ýê­çîòîêñèí, êîòîðûé ôèêñèðóåòñÿ íà êëåòî÷íûõ ìåìáðàíàõ, à çàòåì ïðîíèêàåò â ãëóáü òêàíåé è îêàçûâàåò âîçäåéñòâèå íà íåðâíûå îêîí÷àíèÿ, çàëîæåííûå â ñòåíêàõ ñîñóäîâ, ÷òî ïðèâîäèò ê çà­ñòîéíîé ãèïåðåìèè è ôîðìèðîâàíèþ ýêññóäàòà.

Íà ìåñòå âíåäðåíèÿ âîçáóäèòåëÿ äèôòåðèè (çåâ, íîñ, òðà­õåÿ, êîíúþíêòèâà ãëàçà, êîæà, âóëüâà âëàãàëèùà, ðàíåâàÿ ïî­âåðõíîñòü) îáðàçóþòñÿ ïëåíêè ñ áîëüøèì êîëè÷åñòâîì äèôòå­ðèéíûõ êîðèíåáàêòåðèé è äðóãèõ ìèêðîáîâ. Ïðîäóöèðóåìûé ýêçîòîêñèí âûçûâàåò íåêðîç è âîñïàëåíèå ñëèçèñòûõ îáîëî÷åê è êîæè. Âñàñûâàÿñü, îí ïîðàæàåò íåðâíûå êëåòêè, ñåðäå÷íóþ ìûøöó, ïàðåíõèìàòîçíûå îðãàíû, îáóñëîâëèâàåò ÿâëåíèÿ îáùåé òÿæåëîé èíòîêñèêàöèè. Ãëóáîêèå èçìåíåíèÿ ïðîèñõîäÿò â ñåð­äå÷íîé ìûøöå, ñîñóäàõ, íàäïî÷å÷íèêàõ, à òàêæå â öåíòðàëüíîé è ïåðèôåðè÷åñêîé íåðâíîé ñèñòåìå.

Êëèíèêà. Èíêóáàöèîííûé ïåðèîä ïðè äèôòåðèè ïðîäîëæàåò­ñÿ äâà—äåñÿòü äíåé, çàáîëåâàíèå ðàçâèâàåòñÿ îñòðî. Ïî ëîêàëèçà­öèè ïðîöåññà íàèáîëåå ÷àñòî íàáëþäàåòñÿ äèôòåðèÿ çåâà, äûõà­òåëüíûõ ïóòåé (äèôòåðèéíûé êðóï), íîñà. Ñðàâíèòåëüíî ðåäêî âñòðå÷àåòñÿ äèôòåðèÿ ãëàç, óøåé, ïîëîâûõ îðãàíîâ, êîæè. Íà äèô­òåðèþ çåâà ïðèõîäèòñÿ áîëåå 90 % âñåõ çàáîëåâàíèé, âòîðîå ìåñòî çàíèìàåò äèôòåðèÿ íîñà.

Çàáîëåâàíèå íà÷èíàåòñÿ ïîâûøåíèåì òåìïåðàòóðû ñ ñèìïòî­ìàìè îáùåãî íåäîìîãàíèÿ. Ñðàçó æå ïîÿâëÿåòñÿ êàøåëü — âíà÷à­ëå ñóõîé, ãðóáûé «ëàþùèé», îí çàòåì òåðÿåò çâó÷íîñòü, ñòàíîâèò­ñÿ õðèïëûì. Íà ãîðòàíè ïîÿâëÿþòñÿ äèôòåðèéíûå ïëåíêè, îíà îòåêàåò, ñóæàåòñÿ.

Çàòåì ðàçâèâàåòñÿ ñòåíîòè÷åñêàÿ ñòàäèÿ: øóì ïðè äûõàíèè ñâèñòÿùåãî õàðàêòåðà, íàïîìèíàåò çâóê ïèëû â ñûðîì äåðåâå; îí íàñòîëüêî ñèëüíûé, ÷òî ñëûøåí â ñîñåäíåé êîìíàòå. Äûõàíèå ñîïðîâîæäàåòñÿ âòÿãèâàíèåì óñòóï÷èâûõ ìåñò ãðóäíîé êëåòêè, íàïðÿæåíèåì âñïîìîãàòåëüíîé äûõàòåëüíîé ìóñêóëàòóðû.

Òðåòüÿ ñòàäèÿ — àñôèêñè÷åñêàÿ — äëèòñÿ îò íåñêîëüêèõ ìè­íóò äî äåñÿòêîâ ÷àñîâ è õàðàêòåðèçóåòñÿ òàêèìè ñèìïòîìàìè êàê âûðàæåííîå áåñïîêîéñòâî, èçìåíåíèå öâåòà êîæè. Îíà ïîêðûâà­åòñÿ ïîòîì, ãóáû, ëèöî, êîíå÷íîñòè ñèíåþò. Ïîÿâëÿåòñÿ ïàðàäîê­ñàëüíûé ïóëüñ, âîçíèêàþò ñóäîðîãè, íàñòóïàåò ñìåðòü.

Èììóíèòåò ïðè äèôòåðèè íîñèò àíòèòîêñè÷åñêèé è àíòèáàê­òåðèàëüíûé õàðàêòåð, ïðè ýòîì àíòèòîêñè÷åñêèé èììóíèòåò èã­ðàåò îïðåäåëÿþùóþ ðîëü â ïðîòèâîèíôåêöèîííîé çàùèòå.

Ëàáîðàòîðíàÿ äèàãíîñòèêà. Áàêòåðèîëîãè÷åñêèé ìåòîä îñíî­âàí íà âûäåëåíèè ÷èñòîé êóëüòóðû è èäåíòèôèêàöèè âîçáóäèòå­ëåé ïî êóëüòóðàëüíî-ìîðôîëîãè÷åñêèì, áèîõèìè÷åñêèì è òîêñè­÷åñêèì ñâîéñòâàì. Îáúåêòîì äëÿ èññëåäîâàíèÿ ñëóæèò îòäåëÿåìîå çåâà, íîñà, ãëàç, êîæè è ïðî÷åå, êîòîðîå áåðóò âàòíûì òàìïî­íîì è âûñåâàþò íà ñðåäó Êëàóáåðãà èëè êðîâÿíîé òåëëóðèòîâûé àãàð. Ïåðå÷èñëåííûå ñðåäû ñîäåðæàò 0,04 % òåëëóðèòà êàëèÿ, êîòîðûé ïîäàâëÿåò ðîñò ñîïóòñòâóþùåé ìèêðîôëîðû (ñòàôèëîêîêêè, ñòðåïòîêîêêè). ×åðåç 24—48 ÷àñîâ êóëüòèâèðî­âàíèÿ ïðîèçâîäÿò ìèêðîñêîïèþ ìàçêîâ è äàþò ïðåäâàðèòåëü­íûé îòâåò.

Äèôòåðèéíûå êîðèíåáàêòåðèè íå âñåãäà áûâàþò ìîðôîëîãè­÷åñêè òèïè÷íûìè, â ðÿäå ñëó÷àåâ âîçáóäèòåëü ïðèíèìàåò ôîðìó êîðîòêèõ ïàëî÷åê, ðàñïîëîæåííûõ íå ïîä óãëîì, à áåñïîðÿäî÷íî, ñî ñëàáîâûðàæåííîé çåðíèñòîñòüþ. Êðîìå òîãî, îáðàçîâàíèå ãðà­íóë âîëþòèíà ïðîèñõîäèò íå âñåãäà è, ñëåäîâàòåëüíî, ýòîò ïðè­çíàê íå ÿâëÿåòñÿ àáñîëþòíûì. Íàèáîëåå äîñòîâåðíûé ìåòîä — òîêñèíîîáðàçîâàíèå. Äèôôåðåíöèàöèþ òîêñèãåííûõ è íåòîêñèãåííûõ øòàììîâ ïðîèçâîäÿò ïî ìåòîäó Îóõòåðëîíè (ìåòîä äâîé­íîé èììóíîäèôôóçèè â ÷àøêàõ Ïåòðè èëè ìåòîä ïðåöèïèòàöèè â àãàðå). Îí îñíîâàí íà ñïîñîáíîñòè äèôòåðèéíîãî ýêçîòîêñèíà âñòóïàòü â ñîåäèíåíèå ñ àíòèòîêñèíîì è îáðàçîâûâàòü ïðåöèïè­òàòû â âèäå ñòðåë — óñèêîâ.

Ñåðîëîãè÷åñêèå ðåàêöèè ïðèìåíÿþò äëÿ èçó÷åíèÿ êîëëåêòèâ­íîãî èììóíèòåòà. Îíè âêëþ÷àþò: ÐÏÃÀ, îòëè÷àþùóþñÿ âûñîêîé ÷óâñòâèòåëüíîñòüþ, ïðîâîäèìóþ ñ àíòèòåëüíûì äèàãíîñòèêóìîì;

ðåàêöèþ Øèêà, ïðîâîäèìóþ äëÿ îïðåäåëåíèÿ èíäèâèäóàëüíîé íåâîñïðèèì÷èâîñòè ê äèôòåðèéíîìó òîêñèíó; ðåàêöèþ íåéòðà­ëèçàöèè öèòîòîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ äèôòåðèéíîãî òîêñèíà â êóëü­òóðå òêàíè; ÐÈÀ; èììóíîôåðìåíòíûé àíàëèç (ÈÔÀ).

Ëå÷åíèå. Ãëàâíûì â ëå÷åíèè âñåõ ôîðì äèôòåðèè ÿâëÿåòñÿ íåéòðàëèçàöèÿ äèôòåðèéíîãî òîêñèíà àíòèòîêñè÷åñêîé ïðîòè­âîäèôòåðèéíîé ñûâîðîòêîé «Äèàôåðì». Ïðè ñðåäíåé òÿæåñòè çàáîëåâàíèÿ ââîäèòñÿ 5000—15 000 ÌÅ, ïðè òÿæåëûõ ôîðìàõ — 30 000—50 000 ÌÅ. Äëÿ ëå÷åíèÿ íîñèòåëåé íàçíà÷àþò àíòèáèî­òèêè.

Ïðîôèëàêòèêà âêëþ÷àåò ðàííþþ äèàãíîñòèêó, íåìåäëåííóþ ãîñïèòàëèçàöèþ, ïîëíîöåííóþ äåçèíôåêöèþ ïîìåùåíèÿ è ïðåä­ìåòîâ, âûÿâëåíèå íîñèòåëåé.

Ñïåöèôè÷åñêàÿ ïðîôèëàêòèêà ïðîòèâ äèôòåðèè çàêëþ÷àåòñÿ â àêòèâíîé èììóíèçàöèè äåòåé ñ ïÿòèìåñÿ÷íîãî âîçðàñòà ìåòî­äîì ïåðâè÷íîé äâóêðàòíîé âàêöèíàöèè è îòäàëåííîé îäíîêðàò­íîé ðåâàêöèíàöèè êîêëþøíî-äèôòåðèéíî-ñòîëáíÿ÷íîé âàêöèíîé (ÀÊÄÑ).

Âçðîñëîìó íàñåëåíèþ ðåêîìåíäóåòñÿ ïðîâîäèòü îäíîêðàòíûå ïðèâèâêè àäñîðáèðîâàííûì äèôòåðèéíûì àíàòîêñèíîì (ÀÄ-àíàòîêñèí).

Источник: http://lektsii.org/1-20986.html

Ïàòîãåííûå êîðèíåáàêòåðèè — Ô. Ê. ×åðêåñ

Ãëàâà 32. Âîçáóäèòåëü äèôòåðèè

Âîçáóäèòåëü äèôòåðèè îòíîñèòñÿ ê ðîäó Corynebacterium (îò ëàò. coryna — áóëàâà, diphthera — ïëåíêà). Áàêòåðèè èìåþò áóëàâîâèäíûå óòîëùåíèÿ íà êîíöàõ. Ê ýòîìó ðîäó îòíîñÿòñÿ ïàòîãåííûå äëÿ ÷åëîâåêà äèôòåðèéíûå ïàëî÷êè è íåïàòîãåííûå âèäû — ëîæíîäèôòåðèéíûå ïàëî÷êè è äèôòåðîèäû, îáíàðóæèâàåìûå íà ñëèçèñòûõ îáîëî÷êàõ è êîæíûõ ïîêðîâàõ.

Âîçáóäèòåëè äèôòåðèè — Corynebacterium diphtheriae — áûëè îáíàðóæåíû Ò. Êëåáñîì (1883) è âûäåëåíû â ÷èñòîì âèäå Ô. Ëåôôëåðîì (1884).

Ìîðôîëîãèÿ. Âîçáóäèòåëè äèôòåðèè ñëåãêà èçîãíóòûå, òîíêèå ïàëî÷êè, ðàçìåðîì 3-6 × 0,3-0,5 ìêì, íà êîíöàõ êîòîðûõ èìåþòñÿ óòîëùåíèÿ.  ýòèõ óòîëùåíèÿõ èìåþòñÿ çåðíà âîëþòèíà (çåðíà Áàáåøà — Ýðíñòà). Áàêòåðèè äèôòåðèè íåïîäâèæíû, íå èìåþò ñïîð è êàïñóë. Ãðàìïîëîæèòåëüíû. Îíè õîðîøî îêðàøèâàþòñÿ îñíîâíûìè àíèëèíîâûìè êðàñèòåëÿìè, ïðè ýòîì âîëþòèíîâûå çåðíà îêðàøèâàþòñÿ èíòåíñèâíåå. Äëÿ îêðàñêè îáû÷íî ïðèìåíÿþò ùåëî÷íîé ìåòèëåíîâûé ñèíèé èëè êðèñòàëëè÷åñêèé ôèîëåòîâûé. Îñîáåííîñòüþ êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè ÿâëÿåòñÿ èõ ïîëèìîðôíîñòü; â îäíîé êóëàòóðå âñòðå÷àþòñÿ ðàçëè÷íûå ïî ôîðìå è ðàçìåðàì ïàëî÷êè: èçîãíóòûå, ïðÿìûå, äëèííûå, êîðîòêèå, òîëñòûå, èíîãäà êîêêîáàêòåðèè. Õàðàêòåðíî ðàñïîëîæåíèå áàêòåðèé â ìàçêàõ — îíè îáû÷íî ðàñïîëàãàþòñÿ ïîïàðíî ïîä îñòðûì èëè òóïûì óãëîì, â âèäå ðàñòîïûðåííûõ ïàëüöåâ è ò. ä. Ðàñïîëîæåíèå â ìàçêàõ è íàëè÷èå çåðåí âîëþòèíà ÿâëÿåòñÿ äèôôåðåíöèàëüíî-äèàãíîñòè÷åñêèì ïðèçíàêîì ïðè ìèêðîñêîïè÷åñêîì èññëåäîâàíèè. Íåïàòîãåííûå ïðåäñòàâèòåëè ðîäà êîðèíåáàêòåðèé — ëîæíîäèôòåðèéíûå ïàëî÷êè è äèôòåðèîäû ÷àùå ðàñïîëàãàþòñÿ â âèäå ÷àñòîêîëà, çåðíà âîëþòèíà ó íèõ ìîãóò îòñóòñòâîâàòü ëèáî áûòü íà îäíîì êîíöå (ñì. ðèñ. 4).

Êóëüòèâèðîâàíèå. Êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè — ôàêóëüòàòèâíûå àíàýðîáû. Ðàñòóò ïðè òåìïåðàòóðå 35-37° Ñ, ðÍ ñðåäû 7,4-7,8. Îíè íå ðàçìíîæàþòñÿ íà îáû÷íûõ ïèòàòåëüíûõ ñðåäàõ. Êóëüòèâèðóþò èõ íà ñðåäàõ, ñîäåðæàùèõ êðîâü èëè ñûâîðîòêó.

 êîíöå XIX âåêà ôðàíöóçñêèé ó÷åíûé Ý. Ðó äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ áàêòåðèé äèôòåðèè ïðåäëîæèë èñïîëüçîâàòü ñâåðíóòóþ áû÷üþ èëè ëîøàäèíóþ ñûâîðîòêó, à Ô. Ëåôôëåð ðåêîìåíäîâàë äîáàâëÿòü ê íåé áóëüîí (25%) è 1% ãëþêîçó. Íà ýòèõ ñðåäàõ êîðèíåáàêòåðèé ðàñòóò áûñòðî, â òå÷åíèå 14-18 ÷ îáðàçóþò íåñëèâàþùèåñÿ âûïóêëûå êîëîíèè êðåìîâîãî öâåòà (ðîñò íà ñêîøåííîé ñðåäå íàïîìèíàåò øàãðåíåâóþ êîæó). Îäíàêî îòäèôôåðåíöèðîâàòü íà ýòèõ ñðåäàõ äèôòåðèéíûå ïàëî÷êè îò ëîæíîäèôòåðèéíûõ íåâîçìîæíî.

 íàñòîÿùåå âðåìÿ îñíîâíûìè ñðåäàìè äëÿ âûðàùèâàíèÿ ÿâëÿþòñÿ ñðåäà Êëàóáåðãà (ñîäåðæàùàÿ ñûâîðîòêó êðîâè è òåëëóðèò êàëèÿ), õèíîçîëüíàÿ ñðåäà Áóíèíà, ñðåäà Òèíñäàëÿ è äð. Íà îñíîâàíèè êóëüòóðàëüíûõ è ôåðìåíòàòèâíûõ ñâîéñòâ êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè äåëÿò íà òðè áèîâàðà: ãðàâèñ (gravis), ìè òèñ (mitis), èíòåðìåäèóñ (intermedins). Áèîâàð ãðàâèñ îáû÷íî íàõîäèòñÿ â R-ôîðìå. Íà ñðåäå Êëàóáåðãà áàêòåðèè ýòîãî áèîâàðà ðàñòóò â âèäå êðóïíûõ êîëîíèé 2-3 ìì, ñåðîâàòî-÷åðíîãî öâåòà (òàê êàê âîññòàíàâëèâàþò òåëëóðèò â òåëëóð), èìåþò èçðåçàííûå êðàÿ, ÷òî ïðèäàåò èì âèä ðîçåòêè. Ïðè ïðèêîñíîâåíèè ê êîëîíèè ïåòëåé îíà êàê áû ðàññûïàåòñÿ. Íà áóëüîíå áàêòåðèè ýòîãî áèîâàðà îáðàçóþò êðîøàùóþñÿ ïëåíêó è çåðíèñòûé îñàäîê.

Êîðèíåáàêòåðèè áèîâàðà ìèòèñ (mitis) íà ñðåäå Êëàóáåðãà ðàñòóò â âèäå íåáîëüøèõ, ãëàäêèõ êîëîíèé (S-ôîðìà) ÷åðíîãî öâåòà. Íà áóëüîíå îíè äàþò ðàâíîìåðíîå ïîìóòíåíèå.

Êîðèíåáàêòåðèè áèîâàðà èíòåðìåäèóñ (intermedins) ÿâëÿþòñÿ ïðîìåæóòî÷íûìè. Íà ñðåäå Êëàóáåðãà áàêòåðèè ýòîãî áèîâàðà ÷àùå ðàñòóò â âèäå áëåñòÿùèõ, ìåëêèõ, ÷åðíûõ êîëîíèé (ýòîò áèîâàð âñòðå÷àåòñÿ ðåäêî).

Ôåðìåíòàòèâíûå ñâîéñòâà. Âñå òðè áèîâàðà äèôòåðèéíûõ áàêòåðèé îáëàäàþò ôåðìåíòîì öèñòèíàçîé, ðàñùåïëÿþùèì öèñòèí ñ îáðàçîâàíèåì ñåðîâîäîðîäà. Ýòè ñâîéñòâà èñïîëüçóþòñÿ äëÿ äèôôåðåíöèàöèè âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè îò íåïàòîãåííûõ ïðåäñòàâèòåëåé ýòîãî ðîäà (òàáë. 49).

Òàáëèöà 49. Ñâîéñòâà âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè è áëèçêèõ ê íèì êîðèíåáàêòåðèé

Ïðèìå÷àíèå. + ïîëîæèòåëüíàÿ ðåàêöèÿ (ðàñùåïëÿåò); — îòðèöàòåëüíàÿ ðåàêöèÿ (íå ðàñùåïëÿåò).

Âîçáóäèòåëè âñåõ òðåõ áèîâàðîâ ðàñùåïëÿþò ãëþêîçó è ìàëüòîçó äî îáðàçîâàíèÿ êèñëîòû. Ñ. gravis ðàñùåïëÿþò êðàõìàë. Ýòî ñâîéñòâî îòëè÷àåò åãî îò äâóõ äðóãèõ áèîâàðîâ. Êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè âîññòàíàâëèâàþò íèòðàòû â íèòðèòû, íå îáðàçóþò èíäîë, íå ðàçëàãàþò ìî÷åâèíó.

Êîðèíåáàêòåðèè äèôòåðèè îáðàçóþò íåéðàìèíèäàçó, ãèàëóðîíèäàçó è äðóãèå ôåðìåíòû ïàòîãåííîñòè.

Òîêñèíîîáðàçîâàíèå. Âèðóëåíòíûå øòàììû âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè ïðîäóöèðóþò ýêçîòîêñèí. Õèìè÷åñêè îí ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé òåðìîëàáèëüíûé áåëîê, ñîñòîÿùèé èç Äâóõ ôðàêöèé. Ôðàêöèÿ  ôèêñèðóåò òîêñèí íà ÷óâñòâèòåëüíûõ ê íåìó òêàíÿõ îðãàíèçìà. Ôðàêöèÿ À îòâåòñòâåííà çà òîêñè÷åñêîå äåéñòâèå. Ñèëó òîêñèíà äèôòåðèéíûõ êóëüòóð ìîæíî óñòàíàâëèâàòü «in vivo» íà ÷óâñòâèòåëüíûõ ê ýòîìó òîêñèíó ìîðñêèõ ñâèíêàõ. Dim äèôòåðèéíîãî ýêçîòîêñèíà — ìèíèìàëüíàÿ ñìåðòåëüíàÿ äîçà, ýòî ìèíèìàëüíîå êîëè÷åñòâî ÿäà, óáèâàþùåå ìîðñêóþ ñâèíêó ìàññîé 250 ã íà 4-é äåíü.

Íàëè÷èå ýêçîòîêñèíà ìîæíî îáíàðóæèòü òàêæå «in vitro» — íà ïëîòíîé ïèòàòåëüíîé ñðåäå. Ýòîò ìåòîä øèðîêî èñïîëüçóåòñÿ â ïðàêòè÷åñêîé ðàáîòå. Äèôòåðèéíûé ýêçîòîêñèí ìàëîóñòîé÷èâ. Îí áûñòðî ðàçðóøàåòñÿ ïîä âëèÿíèåì òåìïåðàòóðû, ñâåòà è êèñëîðîäà âîçäóõà. Ïîñëå äîáàâëåíèÿ ê òîêñèíó ôîðìàëèíà (0,3-0,4%) è âûäåðæèâàíèÿ åãî ïðè òåìïåðàòóðå 37-38° Ñ â òå÷åíèå íåñêîëüêèõ íåäåëü îí ïåðåõîäèò â àíàòîêñèí, êîòîðûé òåðÿåò ÿäîâèòîñòü, íî ñîõðàíÿåò àíòèãåííûå ñâîéñòâà òîêñèíà. Òîêñèíû, îáðàçóåìûå ðàçëè÷íûìè øòàììàìè, íå ðàçëè÷àþòñÿ ìåæäó ñîáîé è ìîãóò áûòü íåéòðàëèçîâàíû äèôòåðèéíûì àíòèòîêñèíîì * .

* (Â íàñòîÿùåå âðåìÿ óñòàíîâëåíî, ÷òî âñå áèîâàðû êîðèíåáàêòåðèé ìîãóò áûòü òîêñèãåííûìè è íåòîêñèãåííûìè.)

Àíòèãåííàÿ ñòðóêòóðà. Ó áàêòåðèé äèôòåðèè èìååòñÿ ïîâåðõíîñòíûé òåðìîëàáèëüíûé áåëêîâûé àíòèãåí è òèïîñïåöèôè÷åñêèé ïîëèñàõàðèäíûé Î-àíòèãåí. Êðîìå ýòîãî, ñðåäè êîðèíåáàêòåðèé ðàçëè÷àþò 19 ôàãîâàðîâ, êîòîðûå ó÷èòûâàþòñÿ ïðè èäåíòèôèêàöèè êóëüòóð. Ñ ïîìîùüþ ôàãîâàðîâ âûÿâëÿþò èñòî÷íèê çàáîëåâàíèÿ.

Óñòîé÷èâîñòü ê ôàêòîðàì îêðóæàþùåé ñðåäû. Âîçáóäèòåëè äèôòåðèèè ñðàâíèòåëüíî óñòîé÷èâû. Òåìïåðàòóðà 60° Ñ óáèâàåò èõ ÷åðåç 10-15 ìèí, 100° Ñ — ÷åðåç ìèíóòó.  ïëåíêå îíè âûäåðæèâàþò íàãðåâàíèå äî 90° Ñ. Íà ñâåðíóòîé ñûâîðîòêå ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå ñîõðàíÿþòñÿ äî 2 ìåñ, íà äåòñêèõ èãðóøêàõ — íåñêîëüêî ñóòîê. Íèçêèå òåìïåðàòóðû êîðèíåáàêòåðèé ïåðåíîñÿò õîðîøî. Ê âûñóøèâàíèþ âîçáóäèòåëè äèôòåðèè äîâîëüíî óñòîé÷èâû. Äåçèíôèöèðóþùèå âåùåñòâà (3% ðàñòâîð ôåíîëà, 1% ðàñòâîð ñóëåìû, 10% ðàñòâîð ïåðåêèñè âîäîðîäà) óáèâàþò ýòè áàêòåðèè â òå÷åíèå íåñêîëüêèõ ìèíóò.

Âîñïðèèì÷èâîñòü æèâîòíûõ.  åñòåñòâåííûõ óñëîâèÿõ æèâîòíûå äèôòåðèåé íå áîëåþò. Èç ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ íàèáîëåå âîñïðèèì÷èâû ìîðñêèå ñâèíêè è êðîëèêè. Ïðè âíóòðèêîæíîì èëè ïîäêîæíîì çàðàæåíèè ó íèõ ðàçâèâàåòñÿ êàðòèíà òîêñèêîèíôåêöèè ñ îáðàçîâàíèåì íà ìåñòå ââåäåíèÿ âîñïàëåíèÿ, îòåêà, íåêðîçà.  íàäïî÷å÷íèêàõ íàáëþäàþòñÿ êðîâîèçëèÿíèÿ.

Èñòî÷íèêè çàáîëåâàíèÿ. Áîëüíûå ëþäè è áàêòåðèîíîñèòåëè.

Ïóòè ïåðåäà÷è. Âîçäóøíî-êàïåëüíûé ïóòü, êîíòàêòíî-áûòîâîé (÷åðåç ïîñóäó, èãðóøêè, êíèãè, ïîëîòåíöà è ò. ä.).

Çàáîëåâàíèå ó ÷åëîâåêà: 1) äèôòåðèÿ çåâà; 2) äèôòåðèÿ íîñà.

Ðåæå âîçíèêàåò äèôòåðèÿ òðàõåè, áðîíõîâ, ãëàç, óõà, âëàãàëèùà è äèôòåðèÿ ïîâðåæäåííîé êîæè.

Ïàòîãåíåç. Âõîäíûìè âîðîòàìè ÿâëÿþòñÿ ñëèçèñòûå îáîëî÷êè äûõàòåëüíûõ ïóòåé è ïîâðåæäåííàÿ êîæà. Ïîïàâ íà ñëèçèñòóþ îáîëî÷êó, âîçáóäèòåëè äèôòåðèè ðàçìíîæàþòñÿ â ìåñòå âíåäðåíèÿ è âûçûâàþò íåêðîç òêàíè. Îáðàçóåòñÿ ïëåíêà, òåñíî ñâÿçàííàÿ ñ ïîäëåæàùèìè òêàíÿìè. Íà ïîâåðõíîñòè ñëèçèñòîé ïîÿâëÿþòñÿ ãðÿçíî-ñåðûå èëè æåëòîâàòûå íàëåòû, ñîñòîÿùèå èç ðàçðóøåííîãî ýïèòåëèÿ, ôèáðèíà, ëåéêîöèòîâ è êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè. Ïðè ñíÿòèè ïëåíêè âàòíûì òàìïîíîì èëè øïàòåëåì ïîâåðõíîñòü ñëèçèñòîé ìîæåò êðîâîòî÷èòü.

 ïðîöåññå ðàçìíîæåíèÿ êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè â íåêðîòè÷åñêèõ ó÷àñòêàõ íàêàïëèâàåòñÿ ýêçîòîêñèí, êîòîðûé ìîæåò ïðèâåñòè ê îòåêó ñëèçèñòîé îáîëî÷êè è êëåò÷àòêè. Ñî ñëèçèñòîé îáîëî÷êè îòåê ìîæåò ðàñïðîñòðàíÿòüñÿ íà ãîðòàíü, áðîíõè è âûçâàòü ÿâëåíèÿ àñôèêñèè. Òîêñèí, öèðêóëèðóþùèé â êðîâè, èçáèðàòåëüíî ïîðàæàåò ñåðäå÷íóþ ìûøöó, íàäïî÷å÷íèêè è êëåòêè íåðâíîé òêàíè.

Äèôòåðèÿ — ýòî òîêñèêîèíôåêöèÿ. Òÿæåñòü ïðîöåññà çàâèñèò îò ñòåïåíè òîêñèãåííîñòè øòàììà è îò çàùèòíûõ ñèë îðãàíèçìà.

Èììóíèòåò. Íåâîñïðèèì÷èâîñòü îáóñëîâëèâàåòñÿ àíòèòîêñè÷åñêèì è àíòèáàêòåðèàëüíûì èììóíèòåòîì. Ãðóäíûå äåòè íå áîëåþò, òàê êàê ó íèõ èìååòñÿ ïàññèâíûé èììóíèòåò, ïåðåäàííûé îò ìàòåðè.

Î íàëè÷èè àíòèòîêñè÷åñêîãî èììóíèòåòà ñóäÿò ïî ðåàêöèè Øèêà. Äëÿ ïîñòàíîâêè ðåàêöèè 1 /₄₀ Dlm (ëåòàëüíîé äîçû òîêñèíà äëÿ ìîðñêîé ñâèíêè), ñîäåðæàùåãîñÿ â 0,2 ìë èçîòîíè÷åñêîãî ðàñòâîðà íàòðèÿ õëîðèäà, ââîäÿò âíóòðèêîæíî â îáëàñòè ïðåäïëå÷üÿ. Ïðè îòñóòñòâèè â êðîâè àíòèòîêñèíà â ìåñòå ââåäåíèÿ ÷åðåç 24-48 ÷ ïîÿâëÿåòñÿ êðàñíîòà è ïðèïóõëîñòü (äî 2 ñì â äèàìåòðå). Ïðè íàëè÷èè àíòèòîêñèíà ïðèïóõëîñòè è êðàñíîòû íåò (èìåþùèéñÿ â êðîâè àíòèòîêñèí íåéòðàëèçîâàë ââåäåííûé òîêñèí).

Ïåðåíåñåííîå çàáîëåâàíèå îñòàâëÿåò èììóíèòåò. Îäíàêî â 6-7% ñëó÷àåâ íàáëþäàþòñÿ ïîâòîðíûå çàáîëåâàíèÿ.

Ïðîôèëàêòèêà. Ðàííÿÿ äèàãíîñòèêà. Èçîëÿöèÿ. Äåçèíôåêöèÿ. Âûÿâëåíèå íîñèòåëåé òîêñèãåííîé äèôòåðèéíîé ïàëî÷êè.

Ñïåöèôè÷åñêàÿ ïðîôèëàêòèêà îñóùåñòâëÿåòñÿ ââåäåíèåì àíàòîêñèíà.  ÑÑÑÐ ïðîâîäÿò îáÿçàòåëüíóþ âàêöèíàöèþ äåòåé âàêöèíîé ÀÊÄÑ — ýòî êîìïëåêñíàÿ âàêöèíà, â êîòîðóþ âõîäÿò äèôòåðèéíûé è ñòîëáíÿ÷íûé àíàòîêñèí è âçâåñü óáèòûõ êîêëþøíûõ ïàëî÷åê. Âàêöèíèðóþò äåòåé ñ 5-6 ìåñÿöåâ ñ ïîñëåäóþùåé ðåâàêöèíàöèåé. Äëÿ ðåâàêöèíàöèè ââîäÿò âàêöèíó áåç êîêëþøíûõ ïàëî÷åê.

Ñïåöèôè÷åñêîå ëå÷åíèå. Ïðèìåíÿþò ïðîòèâîäèôòåðèéíóþ àíòèòîêñè÷åñêóþ ñûâîðîòêó. Äîçà è êðàòíîñòü îïðåäåëÿåòñÿ ëå÷àùèì âðà÷îì, ââîäÿò òàêæå àíòèìèêðîáíûå ïðåïàðàòû.

Êîíòðîëüíûå âîïðîñû

1. Êàêîâà ìîðôîëîãèÿ êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè è êàêèå èìåþòñÿ áèîâàðû?

2. Íà êàêèõ ñðåäàõ âûðàùèâàþò áàêòåðèè äèôòåðèè è êàêîâ õàðàêòåð ðîñòà?

3. Îòíîøåíèå ê êàêîìó óãëåâîäó ïîçâîëÿåò îòëè÷èòü áèîâàð gravis îò äðóãèõ áèîâàðîâ äèôòåðèè?

4. Êàêîâ ïóòü ïåðåäà÷è è ãäå ÷àùå ëîêàëèçóåòñÿ âîçáóäèòåëü äèôòåðèè ó áîëüíîãî?

5. Êàêîâû ñïåöèôè÷åñêàÿ ïðîôèëàêòèêà è ñïåöèôè÷åñêîå ëå÷åíèå äèôòåðèè?

Ìèêðîáèîëîãè÷åñêîå èññëåäîâàíèå

Öåëü èññëåäîâàíèÿ: âûäåëåíèå âîçáóäèòåëÿ äëÿ ïîñòàíîâêè äèàãíîçà. Âûÿâëåíèå áàêòåðèîíîñèòåëåé äèôòåðèè ïî ýïèäåìèîëîãè÷åñêèì ïîêàçàíèÿì. Âûÿâëåíèå ýêçîòîêñèíà ó âûäåëåííîé êóëüòóðû.

1. Îòäåëÿåìîå ñëèçèñòîé îáîëî÷êè çåâà.

2. Îòäåëÿåìîå ñëèçèñòîé îáîëî÷êè íîñà.

3. Îòäåëÿåìîå ñëèçèñòîé îáîëî÷êè ãëàçà.

5. Îòäåëÿåìîå ñëèçèñòîé îáîëî÷êè âëàãàëèùà.

6. Îòäåëÿåìîå ðàíû.

Ìàòåðèàë äëÿ èññëåäîâàíèÿ çàâèñèò îò ëîêàëèçàöèè ïðîöåññà.

Ñïîñîáû ñáîðà ìàòåðèàëà

Ïðè ëþáîé ëîêàëèçàöèè ïðîöåññà îáÿçàòåëüíî èññëåäóåò ñëèçèñòóþ çåâà è íîñà. Ìàòåðèàë ñîáèðàþò âàòíûì òàìïîíîì, äëÿ ÷åãî èñïîëüçóþò ìåòàëëè÷åñêóþ ïðîâîëîêó, æåëàòåëüíî àëþìèíèåâóþ, íà îäèí êîíåö êîòîðîé ïëîòíî íàêðó÷èâàþò âàòó, çàòåì òàìïîí ìîíòèðóþò â êîðêîâóþ ïðîáêó, ïîìåùàþò â ïðîáèðêó è ñòåðèëèçóþò â ïå÷è Ïàñòåðà ïðè òåìïåðàòóðå 160° Ñ 1 òàìïîí òå÷åíèå ÷àñà èëè â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå 112° Ñ.

Ïðèìå÷àíèÿ. 1. Ìàòåðèàë ñîáèðàþò íàòîùàê ëèáî íå ðàíüøå ÷åì ÷åðåç 2 ÷ ïîñëå åäû è íå ðàíåå ÷åì ÷åðåç 4 äíÿ ïîñëå ëå÷åíèÿ àíòèáèîòèêàìè èëè äðóãèìè àíòèáàêòåðèàëüíûìè ñðåäñòâàìè. 2. Åñëè ìàòåðèàë áåðóò èç çåâà è íîñà, òî ïðîáèðêè ñ îáîèìè òàìïîíàìè íàäïèñûâàþò è ñâÿçûâàþò âìåñòå. Ïîñåâû äåëàþò ðàçäåëüíî è èññëåäîâàíèå ìàòåðèàëà èç êàæäîãî òàìïîíà âåäóò êàê ñàìîñòîÿòåëüíóþ ðàáîòó. 3 Ìàòåðèàë, ñîáðàííûé ñóõèì òàìïîíîì, äîëæåí áûòü ïîñåÿí íå ïîçäíåå ÷åì ÷åðåç 2-3 ÷ ïîñëå çàáîðà. Ïðè íåîáõîäèìîñòè òðàíñïîðòèðîâêè ñîáðàííîãî ìàòåðèàëà òàìïîí ïðåäâàðèòåëüíî ñìà÷èâàþò 5% ðàñòâîðîì ãëèöåðèíà â èçîòîíè÷åñêîì ðàñòâîðå íàòðèÿ õëîðèäà.

Ïåðâûé äåíü èññëåäîâàíèÿ

×àøêè âûíèìàþò èç òåðìîñòàòà è ïðîñìàòðèâàþò. Ðîñò áàêòåðèé íà ñðåäå Êëàóáåðãà ìîæåò áûòü çàìåäëåí èç-çà íàëè÷èÿ èíãèáèòîðîâ â ñðåäå.  ýòîì ñëó÷àå ÷àøêè ñòàâÿò â òåðìîñòàò åùå íà 24 ÷.

×àøêè âûíèìàþò èç òåðìîñòàòà, ïðîñìàòðèâàþò èõ ñ ïîìîùüþ ëóïû èëè ñòåðåîñêîïè÷åñêîãî ìèêðîñêîïà. Ïðè íàëè÷èè ïîäîçðèòåëüíûõ êîëîíèé ÷àñòü èõ ïîä êîíòðîëåì ñòåðåîñêîïè÷åñêîãî ìèêðîñêîïà âûäåëÿþò íà àãàð ñ 25% ñûâîðîòêîé è íà ñòîëáèê ñî ñðåäîé Ïèçó äëÿ îïðåäåëåíèÿ ôåðìåíòà öèñòèíàçû. Èç äðóãîé ÷àñòè êîëîíèé ñòàâÿò ïðîáó íà òîêñèãåííîñòü.

Ïðè ìèêðîñêîïè÷åñêîì èññëåäîâàíèè êîëîíèé, ñíÿòûõ ñî ñðåäû Êëàóáåðãà, êîðèíåáàêòåðèè äèôòåðèè òåðÿþò ñâîþ ñïåöèôè÷íîñòü: îòñóòñòâóåò çåðíèñòîñòü, èçìåíÿåòñÿ âåëè÷èíà, ðàñïîëîæåíèå ñîõðàíÿåòñÿ. Ïðè ïîñåâå èõ íà ñðåäû ñ ñûâîðîòêîé ìîðôîëîãè÷åñêàÿ ñïåöèôè÷íîñòü âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè âîññòàíàâëèâàåòñÿ.

Ïðîáà íà íàëè÷èå ôåðìåíòà öèñòèíàçû è îïðåäåëåíèå òîêñèãåííîñòè ÿâëÿþòñÿ îáÿçàòåëüíûìè ïðè èäåíòèôèêàöèè âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè. Åñëè ðåçóëüòàò ýòèõ îïûòîâ, ïðîâåäåííûõ ñ ÷àñòüþ êîëîíèé ñî ñðåäû Êëàóáåðãà, íåäîñòàòî÷íî ÷åòêèé èëè îòðèöàòåëüíûé, òî îïûò ïîâòîðÿþò, èñïîëüçóÿ âûäåëåííóþ ÷èñòóþ êóëüòóðó.

Ïðîáà íà öèñòèíàçó. Ïðîâîäÿò ïîñåâ èññëåäóåìîé êóëüòóðû óêîëîì â öåíòð ñòîëáèêà ñðåäû Ïèçó. Ïðè ïîëîæèòåëüíîé ðåàêöèè ÷åðåç 18-24 ÷ ïî õîäó óêîëà íàáëþäàåòñÿ ïî÷åðíåíèå, à âîêðóã ÷åðíîãî ñòåðæíÿ îáðàçóåòñÿ òåìíîå îáëà÷êî; ïî÷åðíåíèå ïðîèñõîäèò â ðåçóëüòàòå òîãî, ÷òî ôåðìåíò öèñòèíàçà ðàñùåïëÿåò öèñòèí, âõîäÿùèé â ñîñòàâ ñðåäû Ïèçó, è îñâîáîäèâøàÿñÿ ñåðà âñòóïàåò â ðåàêöèþ ñ àöåòàòîì ñâèíöà — îáðàçóåòñÿ ñóëüôèò ñâèíöà ÷åðíîãî öâåòà. Äèôòåðîèäû è ëîæíîäèôòåðèéíûå ïàëî÷êè íå ñîäåðæàò ôåðìåíò öèñòèíàçó, ïîýòîìó ïðè ðîñòå èõ íà ñðåäå Ïèçó öâåò ñðåäû íå èçìåíÿåòñÿ.

Îïðåäåëåíèå ýêçîòîêñèíà. Ïðîâîäÿò ìåòîäîì äèôôóçíîé ïðåöèïèòàöèè â ãåëå. Ìåòîä îñíîâàí íà âçàèìîäåéñòâèè òîêñèíà ñ àíòèòîêñèíîì.  òåõ ó÷àñòêàõ àãàðà, ãäå ýòè êîìïîíåíòû âçàèìîäåéñòâóþò, îáðàçóåòñÿ ïðåöèïèòàò â âèäå çàêðóãëåííûõ ëèíèé.

Ìåòîäèêà îïðåäåëåíèÿ: â ÷àøêè Ïåòðè ðàçëèâàþò ðàñòîïëåííûé è îõëàæäåííûé äî 50° Ñ àãàð Ìàðòåíà ðÍ 7,8 (íà àãàðå Ìàðòåíà ëó÷øå ïðîäóöèðóåòñÿ ýêçîòîêñèí). Êîëè÷åñòâî àãàðà â ÷àøêå äîëæíî áûòü íå áîëåå 12-15 ìë, ÷òîáû ñîõðàíèòü ïðîçðà÷íîñòü, — â òîëñòîì ñëîå ëèíèè ïðåöèïèòàöèè ïëîõî âèäíû. Ïîñëå çàñòûâàíèÿ àãàðà íàêëàäûâàþò ïîëîñêó ñòåðèëüíîé ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãè, ñìî÷åííîé ïðîòèâîäèôòåðèéíîé àíòèòîêñè÷åñêîé ñûâîðîòêîé.

Èñïûòóåìóþ êóëüòóðó çàñåâàþò «áëÿøêàìè». Ïîñåâ ïðîèçâîäÿò ïåòëåé. Äèàìåòð áëÿøåê 0,8-1,0 ñì. Ðàññòîÿíèå áëÿøåê îò êðàÿ ïîëîñîê áóìàãè 0,5-0,7 ñì, ìåæäó äâóìÿ áëÿøêàìè èñïûòóåìîé êóëüòóðû çàñåâàþò áëÿøêè çàâåäîìî òîêñèãåííîãî øòàììà. Èñïûòóåìóþ êóëüòóðó ñ÷èòàþò òîêñèãåííîé, åñëè ëèíèè ïðåöèïèòàöèè ÷åòêè è ñëèâàþòñÿ ñ ëèíèÿìè ïðåöèïèòàöèè êîíòðîëüíîãî (òîêñèãåííîãî) øòàììà. Åñëè ëèíèè ïðåöèïèòàöèè ïåðåêðåùèâàþòñÿ ñ ëèíèÿìè êîíòðîëüíîãî øòàììà èëè îòñóòñòâóþò, âûäåëåííóþ êóëüòóðó ñ÷èòàþò íåòîêñèãåííîé (ðèñ. 50).

Ðèñ. 50. Âûÿâëåíèå ýêçîòîêñèíà C.Diphtheriae ìåòîäîì äèôôóçíîé ïðåöèïèòàöèè â àãàðå. 1 — áëÿøêè íåòîêñèãåííîãî øòàììà (ëèíèè ïðåöèïèòàöèè ïåðåêðåùèâàþòñÿ); 2 — áëÿøêè òîêñèãåííîãî øòàììà (ëèíèè ïðåöèïèòàöèè ñîåäèíÿþòñÿ)

Ïðèãîòîâëåíèå ïîëîñîê áóìàãè. Èç ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãè íàðåçàþò ïîëîñêè ðàçìåðîì 1,5×8 ñì, çàâîðà÷èâàþò ïî íåñêîëüêî øòóê â áóìàãó è ñòåðèëèçóþò â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå 120° Ñ â òå÷åíèå 30 ìèí. Ïåðåä ïîñòàíîâêîé îïûòà ñòåðèëüíûì ïèíöåòîì âûíèìàþò îäíó ïîëîñêó, óêëàäûâàþò åå â ñòåðèëüíóþ ÷àøêó Ïåòðè è ñìà÷èâàþò ïðîòèâîäèôòåðèéíîé àíòèòîêñè÷åñêîé ñûâîðîòêîé. Ïðåäâàðèòåëüíî ñûâîðîòêó ðàçâîäÿò òàê, ÷òîáû â 1 ìë ñîäåðæàëîñü 500 ÀÅ (àíòèòîêñè÷åñêèõ åäèíèö). Áóìàæêó ñìà÷èâàþò 0,25 ìë ñûâîðîòêè (125 ÀÅ) è ïîìåùàþò íà ïîâåðõíîñòü ñðåäû. Çàòåì äåëàþò ïîñåâû óêàçàííûì âûøå ñïîñîáîì. Âñå ïîñåâû ñòàâÿò â òåðìîñòàò. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ïðîèçâîäÿò ÷åðåç 18-24 è 48 ÷.

Âûíèìàþò ïîñåâû èç òåðìîñòàòà, ó÷èòûâàþò ðåçóëüòàò. Äåëàþò ìàçêè èç êóëüòóðû, âûðîñøåé íà ñðåäå ñ ñûâîðîòêîé, è îêðàøèâàþò èõ ñèíèì Ëåôôëåðà.

Íàëè÷èå â ìàçêàõ õàðàêòåðíûõ ïî ìîðôîëîãèè ïàëî÷åê, ÷åðíîãî ñ îáëà÷êîì ñòåðæíÿ â ñðåäå Ïèçó è ëèíèé ïðåöèïèòàöèè â àãàðå ïîçâîëÿåò äàòü ïðåäâàðèòåëüíûé îòâåò: «Îáíàðóæåíû êîðèíåáàêòåðèè äèôòåðèè». Èññëåäîâàíèå ïðîäîëæàþò. Ïðè îòñóòñòâèè ëèíèé ïðåöèïèòàöèè â àãàðå èëè èõ íåäîñòàòî÷íîé ÷åòêîñòè èññëåäîâàíèå íà òîêñèãåííîñòü îáÿçàòåëüíî ïîâòîðÿþò ñ âûäåëåííîé ÷èñòîé êóëüòóðîé.

Äëÿ îêîí÷àòåëüíîé èäåíòèôèêàöèè âûäåëåííîé êóëüòóðû è îïðåäåëåíèÿ áèîâàðà âîçáóäèòåëÿ ïðîèçâîäÿò ïîñåâ íà ãëþêîçó, ñàõàðîçó, êðàõìàë è áóëüîí ñ ìî÷åâèíîé (äëÿ âûÿâëåíèÿ ôåðìåíòà óðåàçû). Ïîñåâ íà ñðåäû äåëàþò îáû÷íûì ñïîñîáîì.

Ïðîáà íà óðåàçó. Âûäåëåííóþ êóëüòóðó çàñåâàþò íà áóëüîí ñ ìî÷åâèíîé è èíäèêàòîðîì (êðåçîëîâûé êðàñíûé) è ñòàâÿò â òåðìîñòàò. Óæå ÷åðåç 30-40 ìèí ìîæíî ó÷èòûâàòü ðåçóëüòàò: ïðè ïîñåâå èñòèííûõ âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè öâåò ñðåäû íå èçìåíÿåòñÿ, òàê êàê îíè íå ñîäåðæàò óðåàçó. Ïñåâäîäèôòåðèéíûå ïàëî÷êè ðàñùåïëÿþò ìî÷åâèíó è èçìåíÿþò èíäèêàòîð — ñðåäà ïðèîáðåòàåò ìàëèíîâî-êðàñíûé öâåò.

Ïðîèçâîäÿò ó÷åò ðåçóëüòàòîâ (òàáë. 50).

Òàáëèöà 50. Ôåðìåíòàòèâíûå ñâîéñòâà âûäåëåííûõ âîçáóäèòåëåé

1. Êàêîé ìàòåðèàë èññëåäóþò äëÿ âûÿâëåíèÿ âîçáóäèòåëÿ äèôòåðèè?

2. Êàê ñîáèðàþò ìàòåðèàë äëÿ èññëåäîâàíèÿ íà äèôòåðèþ èç çåâà è íîñà?

3. ×òî íóæíî ñäåëàòü ñ òàìïîíîì, åñëè ñîáðàííûé ìàòåðèàë íåîáõîäèìî òðàíñïîðòèðîâàòü?

4. Ïðè ïîìîùè êàêîãî ïðèáîðà èçó÷àþò êîëîíèè íà ñðåäå Êëàóáåðãà?

5. Êàêèå èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäÿò äëÿ îêîí÷àòåëüíîé èäåíòèôèêàöèè âûäåëåííîé êóëüòóðû?

6. Êàêèìè ìåòîäàìè îïðåäåëÿþò òîêñèãåííîñòü êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè?

1. Âîçüìèòå ó ïðåïîäàâàòåëÿ ïðîâîëîêó è âàòó è ïðèãîòîâüòå 10 òàìïîíîâ, âìîíòèðóéòå èõ â êîðêîâóþ ïðîáêó, âñòàâüòå â ïðîáèðêó è ïðîñòåðèëèçóéòå.

Âíèìàíèå! Ïåðåä ñòåðèëèçàöèåé ïðîâåðüòå, äîñòàòî÷íî ëè ïëîòíî íàêðó÷åí òàìïîí.

2. Âîçüìèòå ó ïðåïîäàâàòåëÿ ñòåðèëüíûå òàìïîíû è ïðîèçâåäèòå çàáîð ìàòåðèàëà äðóã ó äðóãà èç çåâà è íîñà (ðàçíûìè òàìïîíàìè).

3. Èçó÷èòå ïî òàáë. 49 ñâîéñòâà âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè è áëèçêèõ ê íèì êîðèíåáàêòåðèé.

4. Ïîñòàâüòå ïðîáó íà òîêñèãåííîñòü. Áëÿøêè ñäåëàéòå ïåòëåé áåç êóëüòóðû.

5. Çàðèñóéòå õîä èññëåäîâàíèÿ è ïîëîæèòåëüíûé è îòðèöàòåëüíûé ðåçóëüòàò ïðîáû íà òîêñèãåííîñòü.

Òåëëóðîâàÿ ñðåäà Êëàóáåðãà: ïåðâàÿ ñìåñü — ïðåäâàðèòåëüíî çà 1,5 ìåñ ãîòîâÿò ñìåñü èç 20 ìë áàðàíüåé èëè ëîøàäèíîé êðîâè è 10 ìë ãëèöåðèíà.  äåíü ïðèãîòîâëåíèÿ ñðåäû ãîòîâÿò äâå äðóãèå ñìåñè; âòîðàÿ ñìåñü — 50 ìë ÌÏÀ ðÍ 7,5 ðàñòàïëèâàþò è îõëàæäàþò äî òåìïåðàòóðû 50° Ñ, ïîñëå ÷åãî ïðèáàâëÿþò 2,5 ìë ïåðâîé ñìåñè; òðåòüÿ ñìåñü — ñìåøèâàþò 17 ìë áàðàíüåé êðîâè è 33 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû (ñìåñü ïðèãîòàâëèâàþò ñòåðèëüíî), ïîäîãðåâàþò íà âîäÿíîé áàíå äî òåìïåðàòóðû 50° Ñ. Ñîåäèíÿþò âòîðóþ è òðåòüþ ñìåñè, ïðèáàâëÿþò 4 ìë 1% ðàñòâîðà òåëëóðèòà êàëèÿ Ê₂ÒåÎ₃, áûñòðî âñå ïåðåìåøèâàþò è ðàçëèâàþò â ÷àøêè. Ñðåäà ïðîçðà÷íàÿ, èìååò öâåò êðàñíîãî âèíà.

Ñðåäà Ïèçó. Ê 90 ìë ðàñïëàâëåííîãî 2% ÌÏÀ (ðÍ 7,6) äîáàâëÿþò 2 ìë ðàñòâîðà öèñòèíà (1% ðàñòâîð öèñòèíà â 0,1 í. ðàñòâîðå ãèäðîêñèäà íàòðèÿ), òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò è äîáàâëÿþò òàêîé æå îáúåì 0,1 í. ðàñòâîðà ñåðíîé êèñëîòû. Ñðåäó ñòåðèëèçóþò 30 ìèí ïðè òåìïåðàòóðå 112° Ñ. Ê ðàñïëàâëåííîé è îõëàæäåííîé äî 50° Ñ ñðåäå äîáàâëÿþò 1 ìë 10% ðàñòâîðà àöåòàòà ñâèíöà, ñòåðèëèçîâàííîãî äâóêðàòíî òåêó÷èì ïàðîì, ïåðåìåøèâàþò è äîáàâëÿþò 9 ìë íîðìàëüíîé ëîøàäèíîé ñûâîðîòêè. Ñðåäó ñòåðèëüíî ðàçëèâàþò â ìàëåíüêèå ïðîáèðêè ïî 2 ìë. Ïîñåâ ïðîèçâîäÿò óêîëîì.

Ñðåäà Áóíèíà. Ñóõóþ õèíîçîëüíóþ ñðåäó äîáàâëÿþò ê 100 ìë õîëîäíîé âîäû (ðÍ 7,6-7,8), ðàçìåøèâàþò è íàãðåâàþò íà ñëàáîì îãíå äî ðàñïëàâëåíèÿ àãàðà (ïî ïðîïèñè íà ýòèêåòêå). Çàòåì ñðåäó êèïÿòÿò 2-3 ìèí äî îáðàçîâàíèÿ ïåíû, ïîñëå ÷åãî ñðåäó îñòóæàþò äî 50° Ñ è äîáàâëÿþò 5-10 ìë ñòåðèëüíîé äåôèáðèíèðîâàííîé êðîâè. Ñðåäó ïåðåìåøèâàþò è ðàçëèâàþò â ÷àøêè Ïåòðè. Ãîòîâóþ ñðåäó ìîæíî ñîõðàíÿòü 3-4 äíÿ ïðè òåìïåðàòóðå 4-10°.

Ñðåäà Òèíñäàëÿ. Ê 100 ìë 2% ïèòàòåëüíîãî àãàðà, ðàñïëàâëåííîãî è îõëàæäåííîãî äî 50° Ñ, äîáàâëÿþò: 1) 12 ìë 1% ðàñòâîðà öèñòèíà íà 0,1 í. ðàñòâîðå ñåðíîé êèñëîòû; 2) 12 ìë 1% ðàñòâîðà ãèäðîêñèäà íàòðèÿ; 3) 1,8 ìë 2% ðàñòâîðà òåëëóðèòà êàëèÿ; 4) 1,8 ìë 2,5% ðàñòâîðà ãèïîñóëüôèòà íàòðèÿ, 20 ìë íîðìàëüíîé ëîøàäèíîé èëè áû÷üåé ñûâîðîòêè. Ïîñëå äîáàâëåíèÿ êàæäîãî èíãðåäèåíòà ñðåäó òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò. ×àøêè ñî ñðåäîé õðàíÿò 3-4 äíÿ ïðè 10° Ñ.

Источник: http://biologylib.ru/books/item/f00/s00/z0000015/st039.shtml

Corynebacterium diphtheriae выделен в чистой культуре Леффлером в 1884 г.

Размеры дифтерийной палочки: длина 1—6 мкм, толщина 0,3— 0,8 мкм. Отличительной особенностью возбудителя дифтерии является многообразие форм — наряду с длинными изогнутыми, изящными «типичными» палочками микробов встречаются ко­роткие толстые с колбовидными вздутиями на концах, иногда коккообразные клетки, что придает микробу сходство с була­вой. В колбовидных вздутиях часто находят волютиновые зер­на (тельца Бабеша-Эрнета).

Характерен общий вид препарата, особенно если мазок взят с большим количеством микробов. Микробы лежат большими скоплениями и напоминают пакет булавок. В окрашенных мазках могут быть расположены попарно, под острым или прямым углом друг к другу, напоминая римскую цифру V. Дифтерийные микробы неподвижны, спор не образуют, жгу­тиков не имеют, грамположительные, хорошо окрашиваются основными анилиновыми красками, причем особенно интен­сивно окрашиваются волютиновые зерна. При окрашивании по Кецссеру характерной особенностью является то, что зерна волютина окрашиваются в сине-черный цвет, контрастирующий со светло-коричневой окраской всей микробной клетки.

Биология возбудителя дифтерии

Биология: дифтерийные микробы хорошо развиваются при сво­бодном доступе кислорода; растут при температуре от 15 до 40 °С. Могут расти на обычных питательных средах, но лучше и с характерной морфологией развиваются на средах, содер­жащих кровь или сыворотку любого вида животного. На этих средах дифтерийные бактерии вырастают уже через 8—10—12 ч.

• свернутая лошадиная сыворотка (среда РУ);
• среда Леффлера (3 части сыворотки + 1 часть мясного бульона с 1% виноградного сахара, 1% пептона);
• теллуритовые среды.

Очень характерен общий вид роста дифтерийных микробов в пробирках на скошенных свернутых сывороточных средах: ко­лонии не сливаются вместе, вся культура представляется усе­янной зернышками, напоминая шагреневую кожу. Колонии круглые, гладкие или слегка зернистые, непрозрачные с полу­прозрачной периферией, края ровные, но впоследствии стано­вятся извилистыми или даже зазубренными. На теллуритовых средах дифтерийные палочки образуют темно-серые или чер­ные колонии вследствие восстановления теллурита до метал­лического теллура. Восстановление происходит внутри бакте­риальной клетки.

Типы дифтерийных микробов.

На основании культуральных свойств различают 3 типа дифтерийных микробов:

• gravis (тяжелый);
• mitis (средний);
• intermedius (промежуточный).

Тип гравис дает зернистый осадок и пленку на бульоне, на плотных средах образует плоские матовые колонии неправиль­ных очертаний, напоминающие маргаритку. Тип митис равно­мерно мутит бульон и образует выпуклые полупрозрачные ко­лонии. Третий тип обладает некоторыми свойствами первого и второго типов. Часто встречаются также атипичные формы. У дифтерийных бактерий, как и у других микроорганизмов, на­блюдаются:

• гладкие (S) формы колоний;
• шероховатые (R) формы;
• промежуточные (RS).

У высокотоксичных штаммов обычно преобладают R-формы. Дифтерийная палочка вырабатывает кислоту без газообразова­ния в средах с глюкозой, мальтозой и галактозой, но не с лак­тозой, сахарозой и маннитом. Сбраживание крахмала и глико­гена считают характерной особенностью типа гравис. Многие штаммы дают гемолиз на кровяном агаре и лизируют эритро­циты, добавленные к культуре.

Дифтерийные бактерии чувствительны к дезинфицирующим средствам: 10%-ная перекись водорода убивает их в течение 3 мин; 1%-ная сулема, 5%-ная карболовая кислота, 50— 60%-ный алкоголь — в течение 1 мин. Низкие температуры (до -190 °С) не убивают дифтерийные бактерии длительное время. Высокая температура приводит к быстрой их гибели. Под действием прямого солнечного света палочки дифтерии гибнут в течение нескольких дней. В пыли они сохраняют жизнедеятельность до 5 недель, в воде и молоке до 6—20 дней. В трупах сохраняются до 2 недель.

Серотипы дифтерийных бактерий

Серотипы. Дифтерийные бактерии гетерогенны по антигенной структуре, но все вырабатывают одинаковый токсин. Серологи­ческая гетерогенность наблюдается в пределах одного типа. Между 3 типами — гравис, митис и интермедиус — серологиче­ская связь отсутствует. Токсин, продуцируемый всеми 3 типа­ми дифтерийных микробов, тождествен и хорошо нейтрализу­ется обычными противодифтерийными сыворотками. Среди дифтерийных микробов имеются токсичные и нетоксичные штаммы. Дифтерию вызывают только токсичные штаммы, об­ладающие способностью продуцировать экзотоксины. Степень токсичности дифтерийных микробов может быть раз­личной. Единицей измерения силы токсина служит минимальная смертельная доза — наименьшее количество токсина, убиваю­щее морскую свинку массой 250 г в течение 3—4 суток. Кроме экзотоксина дифтерийная палочка продуцирует дермонекроток-син, гемолизин, нейраминидазу и гиалуронидазу.

Источник: http://alexmed.info/2017/09/11/7406/

1. Морфология возбудителя дифтерии

2. Биология возбудителя дифтерии

3. Серотипы дифтерийных бактерий

1. Возбудитель дифтерии Corynebacterium diphtheriae выделен в чистой культуре Леффлером в 1884 г.

Размеры дифтерийной палочки: длина 1—6 мкм, толщина 0,3— 0,8 мкм. Отличительной особенностью возбудителя дифтерии является многообразие форм — наряду с длинными изогнутыми, изящными «типичными» палочками микробов встречаются ко­роткие толстые с колбовидными вздутиями на концах, иногда коккообразные клетки, что придает микробу сходство с була­вой. В колбовидных вздутиях часто находят волютиновые зер­на (тельца Бабеша-Эрнета).

Характерен общий вид препарата, особенно если мазок взят с большим количеством микробов. Микробы лежат большими скоплениями и напоминают пакет булавок. В окрашенных мазках могут быть расположены попарно, под острым или прямым углом друг к другу, напоминая римскую цифру V. Дифтерийные микробы неподвижны, спор не образуют, жгу­тиков не имеют, грамположительные, хорошо окрашиваются основными анилиновыми красками, причем особенно интен­сивно окрашиваются волютиновые зерна. При окрашивании по Кецссеру характерной особенностью является то, что зерна волютина окрашиваются в сине-черный цвет, контрастирующий со светло-коричневой окраской всей микробной клетки.

2. Биология: дифтерийные микробы хорошо развиваются при сво­бодном доступе кислорода; растут при температуре от 15 до 40 °С. Могут расти на обычных питательных средах, но лучше и с характерной морфологией развиваются на средах, содер­жащих кровь или сыворотку любого вида животного. На этих средах дифтерийные бактерии вырастают уже через 8—10—12 ч.

• свернутая лошадиная сыворотка (среда РУ);

• среда Леффлера (3 части сыворотки + 1 часть мясного бульона с 1% виноградного сахара, 1% пептона);

Очень характерен общий вид роста дифтерийных микробов в пробирках на скошенных свернутых сывороточных средах: ко­лонии не сливаются вместе, вся культура представляется усе­янной зернышками, напоминая шагреневую кожу. Колонии круглые, гладкие или слегка зернистые, непрозрачные с полу­прозрачной периферией, края ровные, но впоследствии стано­вятся извилистыми или даже зазубренными. На теллуритовых средах дифтерийные палочки образуют темно-серые или чер­ные колонии вследствие восстановления теллурита до метал­лического теллура. Восстановление происходит внутри бакте­риальной клетки.

Типы дифтерийных микробов. На основании культуральных свойств различают 3 типа дифтерийных микробов:

Тип гравис дает зернистый осадок и пленку на бульоне, на плотных средах образует плоские матовые колонии неправиль­ных очертаний, напоминающие маргаритку. Тип митис равно­мерно мутит бульон и образует выпуклые полупрозрачные ко­лонии. Третий тип обладает некоторыми свойствами первого и второго типов. Часто встречаются также атипичные формы. У дифтерийных бактерий, как и у других микроорганизмов, на­блюдаются:

• гладкие (S) формы колоний;

• шероховатые (R) формы;

У высокотоксичных штаммов обычно преобладают R-формы. Дифтерийная палочка вырабатывает кислоту без газообразова­ния в средах с глюкозой, мальтозой и галактозой, но не с лак­тозой, сахарозой и маннитом. Сбраживание крахмала и глико­гена считают характерной особенностью типа гравис. Многие штаммы дают гемолиз на кровяном агаре и лизируют эритро­циты, добавленные к культуре.

Дифтерийные бактерии чувствительны к дезинфицирующим средствам: 10%-ная перекись водорода убивает их в течение 3 мин; 1%-ная сулема, 5%-ная карболовая кислота, 50— 60%-ный алкоголь — в течение 1 мин. Низкие температуры (до -190 °С) не убивают дифтерийные бактерии длительное время. Высокая температура приводит к быстрой их гибели. Под действием прямого солнечного света палочки дифтерии гибнут в течение нескольких дней. В пыли они сохраняют жизнедеятельность до 5 недель, в воде и молоке до 6—20 дней. В трупах сохраняются до 2 недель.

3. Серотипы. Дифтерийные бактерии гетерогенны по антигенной структуре, но все вырабатывают одинаковый токсин. Серологи­ческая гетерогенность наблюдается в пределах одного типа. Между 3 типами — гравис, митис и интермедиус — серологиче­ская связь отсутствует. Токсин, продуцируемый всеми 3 типа­ми дифтерийных микробов, тождествен и хорошо нейтрализу­ется обычными противодифтерийными сыворотками. Среди дифтерийных микробов имеются токсичные и нетоксичные штаммы. Дифтерию вызывают только токсичные штаммы, об­ладающие способностью продуцировать экзотоксины. Степень токсичности дифтерийных микробов может быть раз­личной. Единицей измерения силы токсина служит минимальная смертельная доза — наименьшее количество токсина, убиваю­щее морскую свинку массой 250 г в течение 3—4 суток. Кроме экзотоксина дифтерийная палочка продуцирует дермонекроток-син, гемолизин, нейраминидазу и гиалуронидазу.

Источник: http://studfiles.net/preview/3882413/page:48/

38. Дифтерия. Морфология и культуральные свойства. Патогенез дифтерии

Возбудитель относится к роду Carinobakterium, виду C. difteria.

Это тонкие палочки, прямые или слегка изогнутые, грамположительные. Для них характерен выраженный полиморфизм. На концах булавовидные утолщения. В мазках бактерии располагаются под углом в виде V или X.

Спор и капсул не образуют. Неподвижны. Имеют фимбрии. Являются факультативными анаэробами или аэробами.

Выделяясь во внешнюю среду со слюной, пленками, дифтерийные палочки способны сохранять жизнеспособность на предметах в течение нескольких дней. Хорошо переносят высушивание.

Каринобактерии требовательны к питательным средам, для их культивирования применяются сывороточные среды или среды с добавлением крови. Используется среда Ру (свернутая сыворотка). Для выделения используются элективные питательные среды с добавлением толурита калия. Каринобактерии подразделяются на три биовара: gravis, mitisintermedius.

1) ворсинки, фимбрии или пили;

2) колонизация и инвазия (за счет ферментов);

3) корд-фактор (нарушает фосфорилирование процессов дыхания клеток макроорганизма);

4) ведущий фактор – экзотоксин.

Пути передачи – воздушно-капельный, контактно-бытовой.

Возбудитель проникает через слизистые оболочки ротоглотки, реже – глаз, половых органов, кожу, раневую поверхность.

Сам возбудитель остается на месте входных ворот инфекции, а патогенез и клиническая картина определены действием экзотоксина, который оказывает общее и местное действие.

Патоморфологическим проявлением взаимодействия макро– и микроорганизма при дифтерии является фибринозное воспаление. В выходящем из сосудов экссудате обнаруживается фибриноген, при свертывании которого на поверхности слизистой оболочки образуются серовато-белого цвета пленчатые налеты, плотно спаянные с окружающей тканью. Они тяжело снимаются, при их отрыве обнажается эрозийная поверхность. Разрастание этих пленок приводят к развитию истинного крупа.

Затем в воспалительный процесс вовлекаются:

1) регионарные лимфатические узлы (лимфадениты);

3) сердце (параличу сердечной мышцы);

4) кора надпочечников;

6) периферическая нервная система – полиневриты, парезы;

7) иммунная система (на 5—7-й дни антитела отсутствуют).

Сила токсина измеряется в DLM. 1 DLM – это минимальное количество токсина, которое при подкожном введении морской свинке весом 250 г вызывает ее гибель на 4—5-е сутки при характерной патолого-анатомической картине.

Источник: http://www.plam.ru/shpori/mikrobiologija/p38.php