морфология дифтерии
Äèôòåðèÿ îñòðàÿ èíôåêöèîííàÿ áîëåçíü, âûçûâàåìàÿ òîêñèãåííûìè êîðèíåáàêòåðèÿìè äèôòåðèè. Ïåðåäàåòñÿ âîçäóøíî-êàïåëüíûì ïóòåì, õàðàêòåðèçóåòñÿ ìåñòíûì ôèáðîçíûì âîñïàëåíèåì ïðåèìóùåñòâåííî ñëèçèñòûõ îáîëî÷åê ðòà è íîñîãëîòêè, ÿâëåíèÿìè îáùåé èíòîêñèêàöèè è ïîðàæåíèåì ñåðäå÷íî-ñîñóäèñòîé, íåðâíîé è âûäåëèòåëüíîé ñèñòåì. Ïîâðåæäàþùåå äåéñòâèå íà îðãàíû è òêàíè îáóñëîâëåíî òîêñèíîì, âûäåëÿåìûì âîçáóäèòåëåì â ìåñòå åãî ëîêàëèçàöèè.
Âîçáóäèòåëü äèôòåðèè îòíîñèòñÿ ê âèäó Ñîãónebacterium diphtheriae ðîäà Ñîãónebacterium, ñåìåéñòâó Actinomyceae.
Ìîðôîëîãèÿ. Îòëè÷èòåëüíîé îñîáåííîñòüþ Ñ. diphtheriae ÿâëÿåòñÿ ïîëèìîðôèçì, ïðîÿâëÿþùèéñÿ â ìíîãîîáðàçèè ôîðì êëåòîê.  êóëüòóðå îäíîãî è òîãî æå øòàììà íàðÿäó ñ òèïè÷íûìè äëèííûìè èçîãíóòûìè ïàëî÷êàìè ìîæíî îáíàðóæèòü êîðîòêèå, òîëñòûå, ñî âçäóòèÿìè íà êîíöàõ, ïðèäàþùèìè èì ñõîäñòâî ñ áóëàâîé. Ðàçìåðû âàðüèðóþò îò 1 äî 6 ìêì ïî äëèíå è îò 0,3 äî 0,8 ìêì â äèàìåòðå. Äëÿ äèôòåðèéíûõ áàêòåðèé õàðàêòåðíî íåðàâíîìåðíîå îêðàøèâàíèå êëåòîê áëàãîäàðÿ íàëè÷èþ â íèõ çåðåí âîëþòèíà, êîòîðûå âîñïðèíèìàþò ëþáîé àíèëèíîâûé êðàñèòåëü èíòåíñèâíåå, ÷åì ïðîòîïëàçìà, âñëåäñòâèå ÷åãî ïðè îêðàñêå ïî Ëåôôëåðó èëè Íåéññåðó âûÿâëÿþòñÿ â âèäå ãðàíóë ñîîòâåòñòâåííî òåìíî-ñèíåãî èëè ñèíå-÷åðíîãî öâåòà. Ýòè ãðàíóëû ðàñïîëàãàþòñÿ ÷àùå âñåãî â áóëàâîâèäíûõ óòîëùåíèÿõ íà îáåèõ êîíöàõ êîðèíåáàêòåðèé.
Âîçáóäèòåëè äèôòåðèè â ìàçêàõ ÷àñòî ðàñïîëàãàþòñÿ ïîïàðíî, ïîä îñòðûì óãëîì îäèí ê äðóãîìó, ÷òî îáúÿñíÿåòñÿ ñâîåîáðàçíûì òèïîì äåëåíèÿ êëåòîê ïóòåì èçëîìà («ùåëêàþùèé òèï» äåëåíèÿ), â îòëè÷èå îò íåïàòîãåííûõ êîðèíåáàêòåðèé, äëÿ êîòîðûõ õàðàêòåðíî ïàðàëëåëüíîå ðàñïîëîæåíèå â ìàçêå.
Íå îáðàçóþò ñïîð, êàïñóë, æãóòèêîâ.
Êóëüòóðàëüíûå ñâîéñòâà. Âîçáóäèòåëü äèôòåðèè àýðîá èëè ôàêóëüòàòèâíûé àíàýðîá, îïòèìàëüíàÿ òåìïåðàòóðà ðîñòà 37 0 Ñ;
ãåòåðîòðîô, òî åñòü îòíîñèòñÿ ê ãðóïïå áàêòåðèé, òðåáóþùèõ äëÿ ñâîåãî ðîñòà îðãàíè÷åñêèå âåùåñòâà. Èñïîëüçóåìûå äëÿ âûðàùèâàíèÿ ñðåäû äîëæíû ñîäåðæàòü â êà÷åñòâå èñòî÷íèêà óãëåðîäà è àçîòà àìèíîêèñëîòû àëàíèí, öèñòèí, ìåòèîíèí è äð.  ñâÿçè ñ ýòèì ñåëåêòèâíûìè ñðåäàìè äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ ÿâëÿþòñÿ òå, êîòîðûå ñîäåðæàò æèâîòíûé áåëîê: êðîâü, ñûâîðîòêó, àñöèòè÷åñêóþ æèäêîñòü. Íà îñíîâàíèè ýòîãî è áûëà ñîçäàíà êëàññè÷åñêàÿ ñðåäà Ëåôôëåðà, à çàòåì ñðåäû Êëàóáåðãà è Òèíäàëÿ.
Ïî êóëüòóðàëüíûì è áèîëîãè÷åñêèì ñâîéñòâàì êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè ïîäðàçäåëÿþòñÿ íà òðè áèîâàðà: gravis, mitis, intermedius, êîòîðûå îòëè÷àþòñÿ ðÿäîì ïðèçíàêîâ. Íàèáîëåå ÷åòêî äèôôåðåíöèàöèþ òèïîâ ìîæíî ïðîâåñòè ïî ôîðìå êîëîíèé ïðè âûðàùèâàíèè êóëüòóðû íà êðîâÿíîì àãàðå ñ äîáàâëåíèåì òåëëóðèòà.
Êîëîíèè òèïà gravis ÷åðåç 4872 ÷àñà äîñòèãàþò â äèàìåòðå 12 ìì, èìåþò âîëíèñòûå êðàÿ, ðàäèàëüíóþ èñ÷åð÷åííîñòü è ïëîñêèé öåíòð (R-ôîðìà) ÷åðíîãî èëè ñåðîãî öâåòà. Ïðè ðîñòå íà áóëüîíå êóëüòóðû òèïà gravis îáðàçóþò íà ïîâåðõíîñòè êðîøàùóþñÿ ïëåíêó. Íà ñðåäàõ Ãèññà ñ äîáàâëåíèåì ñûâîðîòêè îíè ðàñùåïëÿþò ïîëèñàõàðèäû êðàõìàë, äåêñòðèí, ãëèêîãåí ñ îáðàçîâàíèåì êèñëîòû. Òîêñèãåííûå øòàììû êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè îòíîñÿòñÿ ê ýòîìó áèîâàðó.
Êóëüòóðû òèïà mitis íà êðîâÿíîì àãàðå ñ òåëëóðèòîì âûðàñòàþò â êðóïíûå, ñëåãêà âûïóêëûå, ñ ðîâíûì êðàåì, ÷åðíûå ìàòîâûå êîëîíèè (S-ôîðìà). Ïðè ðîñòå íà áóëüîíå äàþò ðàâíîìåðíóþ ìóòü è îñàäîê. Êðàõìàë, äåêñòðèí è ãëèêîãåí íå ðàñùåïëÿþò. Êóëüòóðû ýòîãî òèïà, êàê ïðàâèëî, ìåíåå òîêñèãåííû è èíâàçèîííû, ÷åì êîðèíåáàêòåðèé áèîâàðà gravis.
Êîðèíåáàêòåðèé áèîâàðà intermedius çàíèìàþò ïðîìåæóòî÷íîå ïîëîæåíèå. Êîëîíèè, âûðàùåííûå íà òåëëóðèòîâîì àãàðå, ìåëêèå (RS-ôîðìà), ÷åðíîãî öâåòà, íå ôåðìåíòèðóþò êðàõìàë è ãëèêîãåí, â áóëüîíå ðàñòóò ñ ïîÿâëåíèåì ìóòè è çåðíèñòîãî îñàäêà.
Àíòèãåííàÿ ñòðóêòóðà. Êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè õàðàêòåðèçóþòñÿ ñëîæíîé àíòèãåííîé ñòðóêòóðîé è ìíîãîîáðàçèåì ñåðîëîãè÷åñêèõ ñâîéñòâ.  ðåàêöèè àããëþòèíàöèè âûÿâëÿþòñÿ áåëêîâûå òåðìîëàáèëüíûå R-àíòèãåíû òîêñèíîñïåöèôè÷åñêîé ïðèðîäû, ëîêàëèçîâàííûå â ïîâåðõíîñòíîì ñëîå êëåòî÷íîé ñòåíêè, O-àíòèãåí òèïîñïåöèôè÷åñêèé.
Ñðåäè êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè èìååòñÿ 19 ôàãîòèïîâ, ñ ïîìîùüþ êîòîðûõ âûÿâëÿþò èñòî÷íèêè èíôåêöèè; ó÷èòûâàþòñÿ îíè è ïðè èäåíòèôèêàöèè âûäåëåííûõ êóëüòóð.
Ñåðîëîãè÷åñêèå ñâîéñòâà ëó÷øå âñåãî èçó÷åíû ó øòàììîâ âàðèàíòà gravis. Åãî òîêñèãåííûå øòàììû ïîäðàçäåëåíû íà ïÿòü äåâÿòü ñåðîâàðîâ. Ðàñïðåäåëåíèå ïîñëåäíèõ íà ðàçëè÷íûõ òåððèòîðèÿõ íå ÿâëÿåòñÿ îäèíàêîâûì, íà îäíîé è òîé æå òåððèòîðèè ìîæåò öèðêóëèðîâàòü íåñêîëüêî ñåðîâàðîâ, íî ñðåäè íèõ ïðåîáëàäàåò êàêîé-íèáóäü îäèí.
Ôàêòîðû ïàòîãåííîñòè. Äèôòåðèéíûå êîðèíåáàêòåðèé ïðîäóöèðóþò â áóëüîííûõ êóëüòóðàõ ñèëüíûå ýêçîòîêñèíû (ãèñòîòîêñèí, äåðìîíåêðîòîêñèí, ãåìîëèçèí). Òîêñèíîãåíåç êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè äåòåðìèíèðóåòñÿ ãåíîì, ñîäåðæàùèìñÿ â ïðîôàãå, ñëåäîâàòåëüíî, îñíîâíîå ñðåäñòâî àãðåññèè òîêñèíîîáðàçîâàíèå, íå ñâÿçàíî ñ õðîìîñîìîé áàêòåðèé. Îñîáåííîñòü òîêñèíîîáðàçîâàíèÿ äèôòåðèéíîé ïàëî÷êè îïðåäåëÿåòñÿ íàëè÷èåì åå â ÄÍÊ ñïåöèôè÷åñêîãî ïðîôàãà, ñîäåðæàùåãî ñòðóêòóðíûé ãåí òîêñè÷íîñòè, êîòîðûé îáîçíà÷àåòñÿ êàê ÒÎÕ*. Òàêèì îáðàçîì, íå èíôèöèðîâàííàÿ ñïåöèôè÷åñêèì ôàãîì äèôòåðèéíàÿ ïàëî÷êà íå ñïîñîáíà ê òîêñèíîîáðàçîâàíèþ. Ïðè åå èíôèöèðîâàíèè ïðîôàãîì ïðîèñõîäèò ïðèñîåäèíåíèå ÒÎX + ê ÄÍÊ ìèêðîáíîé êëåòêè.  ñâÿçè ñ òåì, ÷òî äèôòåðèéíàÿ ïàëî÷êà ñïîñîáíà êîíòðîëèðîâàòü ïðîôàã, ýôôåêò ëèçîãåíèè ðåàëèçóåòñÿ ëèøü ïðè ôèçèîëîãè÷åñêîì ñòàðåíèè èëè èíãèáèöèè îñíîâíûõ ïðîöåññîâ æèçíåäåÿòåëüíîñòè ìèêðîáíîé êëåòêè, êîãäà ïðîôàã âûõîäèò èç-ïîä êîíòðîëÿ è îáåñïå÷èâàåò âûðàæåííóþ ôàãîâóþ ðåïðîäóêöèþ.
 îñíîâå òîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ äèôòåðèéíîãî òîêñèíà ëåæèò ñïîñîáíîñòü ïîäàâëÿòü áèîñèíòåç êëåòî÷íîãî áåëêà, ÷òî ðàññìàòðèâàåòñÿ êàê îñíîâíàÿ ïðè÷èíà ãèáåëè êëåòîê è ñìåðòè îðãàíèçìà îò äèôòåðèéíîé èíôåêöèè. Äèôòåðèéíûé òîêñèí îòíîñèòñÿ ê ñèëüíîäåéñòâóþùèì áàêòåðèàëüíûì òîêñèíàì è óñòóïàåò òîëüêî áîòóëèíè÷åñêîìó è ñòîëáíÿ÷íîìó. Ìîëåêóëà òîêñèíà ñîñòîèò èç äâóõ ôðàãìåíòîâ, îäèí èç êîòîðûõ òåðìîñòàáèëåí è îáëàäàåò ôåðìåíòàòèâíîé àêòèâíîñòüþ, âòîðîé òåðìîëàáèëåí è âûïîëíÿåò ïðîòåêòèâíóþ ôóíêöèþ. Ïîñëå äîáàâëåíèÿ ê òîêñèíó 0,30,4 %-íîãî ðàñòâîðà ôîðìàëèíà è ïîñëåäóþùåãî âûäåðæèâàíèÿ ïðè 38°Ñ â òå÷åíèå òðåõ-÷åòûðåõ íåäåëü ïðîèñõîäèò ïðåâðàùåíèå åãî â àíàòîêñèí, èñïîëüçóåìûé äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ïðîôèëàêòè÷åñêîãî ïðåïàðàòà.
 ïðîöåññå æèçíåäåÿòåëüíîñòè äèôòåðèéíûå áàêòåðèè ïðîäóöèðóþò, êðîìå òîêñèíà, íåéðàìèíèäàçó, ãèàëóðîíèäàçó, íåêðî-òèçèðóþùèé è äèôôóçèîííûé ôàêòîðû.
Ðåçèñòåíòíîñòü. Äèôòåðèéíûå áàêòåðèè îáëàäàþò çíà÷èòåëüíîé óñòîé÷èâîñòüþ ê âîçäåéñòâèþ ôàêòîðîâ îêðóæàþùåé ñðåäû  äèôòåðèéíîé ïëåíêå, êàïåëüêàõ ñðåäû, ïðèëèïøèõ ê ñòåíêå ñòàêàíà, íà ðó÷êàõ äâåðåé, äåòñêèõ èãðóøêàõ îíè ìîãóò ñîõða-
íÿòüñÿ äî 15 äíåé, â âîäå è ìîëîêå äî 20. Âûæèâàåìîñòü íà ïðåäìåòàõ îêðóæàþùåé ñðåäû â îñåííå-âåñåííèé ïåðèîä äîñòèãàåò 5,5 ìåñÿöà è íå ñîïðîâîæäàåòñÿ óòðàòîé èëè îñëàáëåíèåì èõ ïàòîãåííûõ ñâîéñòâ. Ê ÷èñëó íåáëàãîïðèÿòíûõ ôàêòîðîâ îòíîñÿòñÿ ïðÿìûå ñîëíå÷íûå ëó÷è, âûñîêàÿ òåìïåðàòóðà, õèìè÷åñêèå àãåíòû. Ïðè êèïÿ÷åíèè è â àëêîãîëå äèôòåðèéíûå áàêòåðèè ïîãèáàþò â òå÷åíèå 1 ìèíóòû, â 10 %-íîì ðàñòâîðå ïåðåêèñè âîäîðîäà ÷åðåç òðè.
Ýïèäåìèîëîãèÿ. Èñòî÷íèêîì äèôòåðèè ÿâëÿåòñÿ ÷åëîâåê, ó êîòîðîãî îíà ïðîÿâëÿåòñÿ â ðàçíûõ êëèíè÷åñêèõ ôîðìàõ îò òÿæåëûõ òîêñè÷åñêèõ äî ñòåðòûõ ôîðì è çäîðîâîãî áàêòåðèîíîñèòåëüñòâà.
Ýïèäåìèîëîãè÷åñêîå çíà÷åíèå è ðîëü èñòî÷íèêà èíôåêöèè â ðåàëèçàöèè ìåõàíèçìà çàðàæåíèÿ îïðåäåëÿåòñÿ ãëàâíûì îáðàçîì èíòåíñèâíîñòüþ ïåðåäà÷è èíôåêöèîííîãî íà÷àëà (âîçáóäèòåëÿ). Åñòåñòâåííî, ÷åì áîëüøå îáñåìåíåííîñòü ñëèçèñòûõ îáîëî÷åê âåðõíèõ äûõàòåëüíûõ ïóòåé, òåì âåðîÿòíåå âîçìîæíîñòü âûáðîñà âîçáóäèòåëÿ â ìàññîâûõ äîçàõ â îêðóæàþùóþ ñðåäó ïðè ðàçãîâîðå, êàøëå, ÷èõàíèè. Íàèáîëåå îïàñíû â ýòîì îòíîøåíèè áîëüíûå äèôòåðèåé è áàêòåðèîíîñèòåëè. Ïëîòíîñòü çàñåëåíèÿ ñëèçèñòûõ îáîëî÷åê êîðèíåáàêòåðèÿìè äèôòåðèè ðåçêî âîçðàñòàåò ó ëþäåé ñ âîñïàëèòåëüíûìè çàáîëåâàíèÿìè âåðõíèõ äûõàòåëüíûõ ïóòåé, àíãèíàìè, òóáåðêóëåçîì. Ðàñïðîñòðàíåííîñòü áàêòåðèîíîñèòåëüñòâà êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè âàðüèðóåò îò 0 äî 60 %, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î âëèÿíèè ñîñòîÿíèÿ îðãàíèçìà íà ïðîöåññ íîñèòåëüñòâà.
Ïàòîãåíåç. Íàèáîëüøóþ çàáîëåâàåìîñòü äèôòåðèåé îòìå÷àþò îñåíüþ, ÷òî îáúÿñíÿåòñÿ óâåëè÷åíèåì ñêó÷åííîñòè íàñåëåíèÿ â ýòî âðåìÿ ãîäà è ñíèæåíèåì ñîïðîòèâëÿåìîñòè îðãàíèçìà ïîä âëèÿíèåì îõëàæäåíèÿ.
Âîñïðèèì÷èâîñòü ê äèôòåðèéíîé èíôåêöèè, ðàçâèòèå áîëåçíè îáóñëîâëåíû ðÿäîì ôàêòîðîâ, îñíîâíûìè èç êîòîðûõ íàäî ñ÷èòàòü èììóíîëîãè÷åñêîå ñîñòîÿíèå îðãàíèçìà, âîçðàñò, ðåçèñòåíòíîñòü òêàíåé â ìåñòå âíåäðåíèÿ âîçáóäèòåëÿ, ñîñòîÿíèå íåðâíîé ñèñòåìû è îáùåé ðåàêòèâíîñòè.
Ðåàêöèÿ îðãàíèçìà íà âíåäðåíèå áàêòåðèé áûâàåò ìåñòíîé è îáùåé, ñòåïåíü è õàðàêòåð åå çàâèñÿò â îñíîâíîì îò çàùèòíûõ ñèë îðãàíèçìà. Ìåñòíàÿ ðåàêöèÿ ïðîÿâëÿåòñÿ â òî÷êå âíåäðåíèÿ ìèêðîáà. Ïðåæäå ÷åì íà÷èíàåò äåéñòâîâàòü òîêñèí, âîçáóäèòåëü äîëæåí ïðîéòè ñòàäèþ ïðèæèâëåíèÿ è ðàçìíîæåíèÿ íà ñëèçèñòîé îáîëî÷êå ðîòî- è íîñîãëîòêè èëè êîæå. Ïîïàâ íà áëàãîïðèÿòíóþ ïî÷âó, âîçáóäèòåëü ðàçìíîæàåòñÿ, âûðàáàòûâàåò ýêçîòîêñèí, êîòîðûé ôèêñèðóåòñÿ íà êëåòî÷íûõ ìåìáðàíàõ, à çàòåì ïðîíèêàåò â ãëóáü òêàíåé è îêàçûâàåò âîçäåéñòâèå íà íåðâíûå îêîí÷àíèÿ, çàëîæåííûå â ñòåíêàõ ñîñóäîâ, ÷òî ïðèâîäèò ê çàñòîéíîé ãèïåðåìèè è ôîðìèðîâàíèþ ýêññóäàòà.
Íà ìåñòå âíåäðåíèÿ âîçáóäèòåëÿ äèôòåðèè (çåâ, íîñ, òðàõåÿ, êîíúþíêòèâà ãëàçà, êîæà, âóëüâà âëàãàëèùà, ðàíåâàÿ ïîâåðõíîñòü) îáðàçóþòñÿ ïëåíêè ñ áîëüøèì êîëè÷åñòâîì äèôòåðèéíûõ êîðèíåáàêòåðèé è äðóãèõ ìèêðîáîâ. Ïðîäóöèðóåìûé ýêçîòîêñèí âûçûâàåò íåêðîç è âîñïàëåíèå ñëèçèñòûõ îáîëî÷åê è êîæè. Âñàñûâàÿñü, îí ïîðàæàåò íåðâíûå êëåòêè, ñåðäå÷íóþ ìûøöó, ïàðåíõèìàòîçíûå îðãàíû, îáóñëîâëèâàåò ÿâëåíèÿ îáùåé òÿæåëîé èíòîêñèêàöèè. Ãëóáîêèå èçìåíåíèÿ ïðîèñõîäÿò â ñåðäå÷íîé ìûøöå, ñîñóäàõ, íàäïî÷å÷íèêàõ, à òàêæå â öåíòðàëüíîé è ïåðèôåðè÷åñêîé íåðâíîé ñèñòåìå.
Êëèíèêà. Èíêóáàöèîííûé ïåðèîä ïðè äèôòåðèè ïðîäîëæàåòñÿ äâàäåñÿòü äíåé, çàáîëåâàíèå ðàçâèâàåòñÿ îñòðî. Ïî ëîêàëèçàöèè ïðîöåññà íàèáîëåå ÷àñòî íàáëþäàåòñÿ äèôòåðèÿ çåâà, äûõàòåëüíûõ ïóòåé (äèôòåðèéíûé êðóï), íîñà. Ñðàâíèòåëüíî ðåäêî âñòðå÷àåòñÿ äèôòåðèÿ ãëàç, óøåé, ïîëîâûõ îðãàíîâ, êîæè. Íà äèôòåðèþ çåâà ïðèõîäèòñÿ áîëåå 90 % âñåõ çàáîëåâàíèé, âòîðîå ìåñòî çàíèìàåò äèôòåðèÿ íîñà.
Çàáîëåâàíèå íà÷èíàåòñÿ ïîâûøåíèåì òåìïåðàòóðû ñ ñèìïòîìàìè îáùåãî íåäîìîãàíèÿ. Ñðàçó æå ïîÿâëÿåòñÿ êàøåëü âíà÷àëå ñóõîé, ãðóáûé «ëàþùèé», îí çàòåì òåðÿåò çâó÷íîñòü, ñòàíîâèòñÿ õðèïëûì. Íà ãîðòàíè ïîÿâëÿþòñÿ äèôòåðèéíûå ïëåíêè, îíà îòåêàåò, ñóæàåòñÿ.
Çàòåì ðàçâèâàåòñÿ ñòåíîòè÷åñêàÿ ñòàäèÿ: øóì ïðè äûõàíèè ñâèñòÿùåãî õàðàêòåðà, íàïîìèíàåò çâóê ïèëû â ñûðîì äåðåâå; îí íàñòîëüêî ñèëüíûé, ÷òî ñëûøåí â ñîñåäíåé êîìíàòå. Äûõàíèå ñîïðîâîæäàåòñÿ âòÿãèâàíèåì óñòóï÷èâûõ ìåñò ãðóäíîé êëåòêè, íàïðÿæåíèåì âñïîìîãàòåëüíîé äûõàòåëüíîé ìóñêóëàòóðû.
Òðåòüÿ ñòàäèÿ àñôèêñè÷åñêàÿ äëèòñÿ îò íåñêîëüêèõ ìèíóò äî äåñÿòêîâ ÷àñîâ è õàðàêòåðèçóåòñÿ òàêèìè ñèìïòîìàìè êàê âûðàæåííîå áåñïîêîéñòâî, èçìåíåíèå öâåòà êîæè. Îíà ïîêðûâàåòñÿ ïîòîì, ãóáû, ëèöî, êîíå÷íîñòè ñèíåþò. Ïîÿâëÿåòñÿ ïàðàäîêñàëüíûé ïóëüñ, âîçíèêàþò ñóäîðîãè, íàñòóïàåò ñìåðòü.
Èììóíèòåò ïðè äèôòåðèè íîñèò àíòèòîêñè÷åñêèé è àíòèáàêòåðèàëüíûé õàðàêòåð, ïðè ýòîì àíòèòîêñè÷åñêèé èììóíèòåò èãðàåò îïðåäåëÿþùóþ ðîëü â ïðîòèâîèíôåêöèîííîé çàùèòå.
Ëàáîðàòîðíàÿ äèàãíîñòèêà. Áàêòåðèîëîãè÷åñêèé ìåòîä îñíîâàí íà âûäåëåíèè ÷èñòîé êóëüòóðû è èäåíòèôèêàöèè âîçáóäèòåëåé ïî êóëüòóðàëüíî-ìîðôîëîãè÷åñêèì, áèîõèìè÷åñêèì è òîêñè÷åñêèì ñâîéñòâàì. Îáúåêòîì äëÿ èññëåäîâàíèÿ ñëóæèò îòäåëÿåìîå çåâà, íîñà, ãëàç, êîæè è ïðî÷åå, êîòîðîå áåðóò âàòíûì òàìïîíîì è âûñåâàþò íà ñðåäó Êëàóáåðãà èëè êðîâÿíîé òåëëóðèòîâûé àãàð. Ïåðå÷èñëåííûå ñðåäû ñîäåðæàò 0,04 % òåëëóðèòà êàëèÿ, êîòîðûé ïîäàâëÿåò ðîñò ñîïóòñòâóþùåé ìèêðîôëîðû (ñòàôèëîêîêêè, ñòðåïòîêîêêè). ×åðåç 2448 ÷àñîâ êóëüòèâèðîâàíèÿ ïðîèçâîäÿò ìèêðîñêîïèþ ìàçêîâ è äàþò ïðåäâàðèòåëüíûé îòâåò.
Äèôòåðèéíûå êîðèíåáàêòåðèè íå âñåãäà áûâàþò ìîðôîëîãè÷åñêè òèïè÷íûìè, â ðÿäå ñëó÷àåâ âîçáóäèòåëü ïðèíèìàåò ôîðìó êîðîòêèõ ïàëî÷åê, ðàñïîëîæåííûõ íå ïîä óãëîì, à áåñïîðÿäî÷íî, ñî ñëàáîâûðàæåííîé çåðíèñòîñòüþ. Êðîìå òîãî, îáðàçîâàíèå ãðàíóë âîëþòèíà ïðîèñõîäèò íå âñåãäà è, ñëåäîâàòåëüíî, ýòîò ïðèçíàê íå ÿâëÿåòñÿ àáñîëþòíûì. Íàèáîëåå äîñòîâåðíûé ìåòîä òîêñèíîîáðàçîâàíèå. Äèôôåðåíöèàöèþ òîêñèãåííûõ è íåòîêñèãåííûõ øòàììîâ ïðîèçâîäÿò ïî ìåòîäó Îóõòåðëîíè (ìåòîä äâîéíîé èììóíîäèôôóçèè â ÷àøêàõ Ïåòðè èëè ìåòîä ïðåöèïèòàöèè â àãàðå). Îí îñíîâàí íà ñïîñîáíîñòè äèôòåðèéíîãî ýêçîòîêñèíà âñòóïàòü â ñîåäèíåíèå ñ àíòèòîêñèíîì è îáðàçîâûâàòü ïðåöèïèòàòû â âèäå ñòðåë óñèêîâ.
Ñåðîëîãè÷åñêèå ðåàêöèè ïðèìåíÿþò äëÿ èçó÷åíèÿ êîëëåêòèâíîãî èììóíèòåòà. Îíè âêëþ÷àþò: ÐÏÃÀ, îòëè÷àþùóþñÿ âûñîêîé ÷óâñòâèòåëüíîñòüþ, ïðîâîäèìóþ ñ àíòèòåëüíûì äèàãíîñòèêóìîì;
ðåàêöèþ Øèêà, ïðîâîäèìóþ äëÿ îïðåäåëåíèÿ èíäèâèäóàëüíîé íåâîñïðèèì÷èâîñòè ê äèôòåðèéíîìó òîêñèíó; ðåàêöèþ íåéòðàëèçàöèè öèòîòîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ äèôòåðèéíîãî òîêñèíà â êóëüòóðå òêàíè; ÐÈÀ; èììóíîôåðìåíòíûé àíàëèç (ÈÔÀ).
Ëå÷åíèå. Ãëàâíûì â ëå÷åíèè âñåõ ôîðì äèôòåðèè ÿâëÿåòñÿ íåéòðàëèçàöèÿ äèôòåðèéíîãî òîêñèíà àíòèòîêñè÷åñêîé ïðîòèâîäèôòåðèéíîé ñûâîðîòêîé «Äèàôåðì». Ïðè ñðåäíåé òÿæåñòè çàáîëåâàíèÿ ââîäèòñÿ 500015 000 ÌÅ, ïðè òÿæåëûõ ôîðìàõ 30 00050 000 ÌÅ. Äëÿ ëå÷åíèÿ íîñèòåëåé íàçíà÷àþò àíòèáèîòèêè.
Ïðîôèëàêòèêà âêëþ÷àåò ðàííþþ äèàãíîñòèêó, íåìåäëåííóþ ãîñïèòàëèçàöèþ, ïîëíîöåííóþ äåçèíôåêöèþ ïîìåùåíèÿ è ïðåäìåòîâ, âûÿâëåíèå íîñèòåëåé.
Ñïåöèôè÷åñêàÿ ïðîôèëàêòèêà ïðîòèâ äèôòåðèè çàêëþ÷àåòñÿ â àêòèâíîé èììóíèçàöèè äåòåé ñ ïÿòèìåñÿ÷íîãî âîçðàñòà ìåòîäîì ïåðâè÷íîé äâóêðàòíîé âàêöèíàöèè è îòäàëåííîé îäíîêðàòíîé ðåâàêöèíàöèè êîêëþøíî-äèôòåðèéíî-ñòîëáíÿ÷íîé âàêöèíîé (ÀÊÄÑ).
Âçðîñëîìó íàñåëåíèþ ðåêîìåíäóåòñÿ ïðîâîäèòü îäíîêðàòíûå ïðèâèâêè àäñîðáèðîâàííûì äèôòåðèéíûì àíàòîêñèíîì (ÀÄ-àíàòîêñèí).
Источник: http://lektsii.org/1-20986.html
Ïàòîãåííûå êîðèíåáàêòåðèè — Ô. Ê. ×åðêåñ
Ãëàâà 32. Âîçáóäèòåëü äèôòåðèè
Âîçáóäèòåëü äèôòåðèè îòíîñèòñÿ ê ðîäó Corynebacterium (îò ëàò. coryna — áóëàâà, diphthera — ïëåíêà). Áàêòåðèè èìåþò áóëàâîâèäíûå óòîëùåíèÿ íà êîíöàõ. Ê ýòîìó ðîäó îòíîñÿòñÿ ïàòîãåííûå äëÿ ÷åëîâåêà äèôòåðèéíûå ïàëî÷êè è íåïàòîãåííûå âèäû — ëîæíîäèôòåðèéíûå ïàëî÷êè è äèôòåðîèäû, îáíàðóæèâàåìûå íà ñëèçèñòûõ îáîëî÷êàõ è êîæíûõ ïîêðîâàõ.
Âîçáóäèòåëè äèôòåðèè — Corynebacterium diphtheriae — áûëè îáíàðóæåíû Ò. Êëåáñîì (1883) è âûäåëåíû â ÷èñòîì âèäå Ô. Ëåôôëåðîì (1884).
Ìîðôîëîãèÿ. Âîçáóäèòåëè äèôòåðèè ñëåãêà èçîãíóòûå, òîíêèå ïàëî÷êè, ðàçìåðîì 3-6 × 0,3-0,5 ìêì, íà êîíöàõ êîòîðûõ èìåþòñÿ óòîëùåíèÿ.  ýòèõ óòîëùåíèÿõ èìåþòñÿ çåðíà âîëþòèíà (çåðíà Áàáåøà — Ýðíñòà). Áàêòåðèè äèôòåðèè íåïîäâèæíû, íå èìåþò ñïîð è êàïñóë. Ãðàìïîëîæèòåëüíû. Îíè õîðîøî îêðàøèâàþòñÿ îñíîâíûìè àíèëèíîâûìè êðàñèòåëÿìè, ïðè ýòîì âîëþòèíîâûå çåðíà îêðàøèâàþòñÿ èíòåíñèâíåå. Äëÿ îêðàñêè îáû÷íî ïðèìåíÿþò ùåëî÷íîé ìåòèëåíîâûé ñèíèé èëè êðèñòàëëè÷åñêèé ôèîëåòîâûé. Îñîáåííîñòüþ êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè ÿâëÿåòñÿ èõ ïîëèìîðôíîñòü; â îäíîé êóëàòóðå âñòðå÷àþòñÿ ðàçëè÷íûå ïî ôîðìå è ðàçìåðàì ïàëî÷êè: èçîãíóòûå, ïðÿìûå, äëèííûå, êîðîòêèå, òîëñòûå, èíîãäà êîêêîáàêòåðèè. Õàðàêòåðíî ðàñïîëîæåíèå áàêòåðèé â ìàçêàõ — îíè îáû÷íî ðàñïîëàãàþòñÿ ïîïàðíî ïîä îñòðûì èëè òóïûì óãëîì, â âèäå ðàñòîïûðåííûõ ïàëüöåâ è ò. ä. Ðàñïîëîæåíèå â ìàçêàõ è íàëè÷èå çåðåí âîëþòèíà ÿâëÿåòñÿ äèôôåðåíöèàëüíî-äèàãíîñòè÷åñêèì ïðèçíàêîì ïðè ìèêðîñêîïè÷åñêîì èññëåäîâàíèè. Íåïàòîãåííûå ïðåäñòàâèòåëè ðîäà êîðèíåáàêòåðèé — ëîæíîäèôòåðèéíûå ïàëî÷êè è äèôòåðèîäû ÷àùå ðàñïîëàãàþòñÿ â âèäå ÷àñòîêîëà, çåðíà âîëþòèíà ó íèõ ìîãóò îòñóòñòâîâàòü ëèáî áûòü íà îäíîì êîíöå (ñì. ðèñ. 4).
Êóëüòèâèðîâàíèå. Êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè — ôàêóëüòàòèâíûå àíàýðîáû. Ðàñòóò ïðè òåìïåðàòóðå 35-37° Ñ, ðÍ ñðåäû 7,4-7,8. Îíè íå ðàçìíîæàþòñÿ íà îáû÷íûõ ïèòàòåëüíûõ ñðåäàõ. Êóëüòèâèðóþò èõ íà ñðåäàõ, ñîäåðæàùèõ êðîâü èëè ñûâîðîòêó.
 êîíöå XIX âåêà ôðàíöóçñêèé ó÷åíûé Ý. Ðó äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ áàêòåðèé äèôòåðèè ïðåäëîæèë èñïîëüçîâàòü ñâåðíóòóþ áû÷üþ èëè ëîøàäèíóþ ñûâîðîòêó, à Ô. Ëåôôëåð ðåêîìåíäîâàë äîáàâëÿòü ê íåé áóëüîí (25%) è 1% ãëþêîçó. Íà ýòèõ ñðåäàõ êîðèíåáàêòåðèé ðàñòóò áûñòðî, â òå÷åíèå 14-18 ÷ îáðàçóþò íåñëèâàþùèåñÿ âûïóêëûå êîëîíèè êðåìîâîãî öâåòà (ðîñò íà ñêîøåííîé ñðåäå íàïîìèíàåò øàãðåíåâóþ êîæó). Îäíàêî îòäèôôåðåíöèðîâàòü íà ýòèõ ñðåäàõ äèôòåðèéíûå ïàëî÷êè îò ëîæíîäèôòåðèéíûõ íåâîçìîæíî.
 íàñòîÿùåå âðåìÿ îñíîâíûìè ñðåäàìè äëÿ âûðàùèâàíèÿ ÿâëÿþòñÿ ñðåäà Êëàóáåðãà (ñîäåðæàùàÿ ñûâîðîòêó êðîâè è òåëëóðèò êàëèÿ), õèíîçîëüíàÿ ñðåäà Áóíèíà, ñðåäà Òèíñäàëÿ è äð. Íà îñíîâàíèè êóëüòóðàëüíûõ è ôåðìåíòàòèâíûõ ñâîéñòâ êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè äåëÿò íà òðè áèîâàðà: ãðàâèñ (gravis), ìè òèñ (mitis), èíòåðìåäèóñ (intermedins). Áèîâàð ãðàâèñ îáû÷íî íàõîäèòñÿ â R-ôîðìå. Íà ñðåäå Êëàóáåðãà áàêòåðèè ýòîãî áèîâàðà ðàñòóò â âèäå êðóïíûõ êîëîíèé 2-3 ìì, ñåðîâàòî-÷åðíîãî öâåòà (òàê êàê âîññòàíàâëèâàþò òåëëóðèò â òåëëóð), èìåþò èçðåçàííûå êðàÿ, ÷òî ïðèäàåò èì âèä ðîçåòêè. Ïðè ïðèêîñíîâåíèè ê êîëîíèè ïåòëåé îíà êàê áû ðàññûïàåòñÿ. Íà áóëüîíå áàêòåðèè ýòîãî áèîâàðà îáðàçóþò êðîøàùóþñÿ ïëåíêó è çåðíèñòûé îñàäîê.
Êîðèíåáàêòåðèè áèîâàðà ìèòèñ (mitis) íà ñðåäå Êëàóáåðãà ðàñòóò â âèäå íåáîëüøèõ, ãëàäêèõ êîëîíèé (S-ôîðìà) ÷åðíîãî öâåòà. Íà áóëüîíå îíè äàþò ðàâíîìåðíîå ïîìóòíåíèå.
Êîðèíåáàêòåðèè áèîâàðà èíòåðìåäèóñ (intermedins) ÿâëÿþòñÿ ïðîìåæóòî÷íûìè. Íà ñðåäå Êëàóáåðãà áàêòåðèè ýòîãî áèîâàðà ÷àùå ðàñòóò â âèäå áëåñòÿùèõ, ìåëêèõ, ÷åðíûõ êîëîíèé (ýòîò áèîâàð âñòðå÷àåòñÿ ðåäêî).
Ôåðìåíòàòèâíûå ñâîéñòâà. Âñå òðè áèîâàðà äèôòåðèéíûõ áàêòåðèé îáëàäàþò ôåðìåíòîì öèñòèíàçîé, ðàñùåïëÿþùèì öèñòèí ñ îáðàçîâàíèåì ñåðîâîäîðîäà. Ýòè ñâîéñòâà èñïîëüçóþòñÿ äëÿ äèôôåðåíöèàöèè âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè îò íåïàòîãåííûõ ïðåäñòàâèòåëåé ýòîãî ðîäà (òàáë. 49).
Òàáëèöà 49. Ñâîéñòâà âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè è áëèçêèõ ê íèì êîðèíåáàêòåðèé
Ïðèìå÷àíèå. + ïîëîæèòåëüíàÿ ðåàêöèÿ (ðàñùåïëÿåò); — îòðèöàòåëüíàÿ ðåàêöèÿ (íå ðàñùåïëÿåò).
Âîçáóäèòåëè âñåõ òðåõ áèîâàðîâ ðàñùåïëÿþò ãëþêîçó è ìàëüòîçó äî îáðàçîâàíèÿ êèñëîòû. Ñ. gravis ðàñùåïëÿþò êðàõìàë. Ýòî ñâîéñòâî îòëè÷àåò åãî îò äâóõ äðóãèõ áèîâàðîâ. Êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè âîññòàíàâëèâàþò íèòðàòû â íèòðèòû, íå îáðàçóþò èíäîë, íå ðàçëàãàþò ìî÷åâèíó.
Êîðèíåáàêòåðèè äèôòåðèè îáðàçóþò íåéðàìèíèäàçó, ãèàëóðîíèäàçó è äðóãèå ôåðìåíòû ïàòîãåííîñòè.
Òîêñèíîîáðàçîâàíèå. Âèðóëåíòíûå øòàììû âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè ïðîäóöèðóþò ýêçîòîêñèí. Õèìè÷åñêè îí ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé òåðìîëàáèëüíûé áåëîê, ñîñòîÿùèé èç Äâóõ ôðàêöèé. Ôðàêöèÿ  ôèêñèðóåò òîêñèí íà ÷óâñòâèòåëüíûõ ê íåìó òêàíÿõ îðãàíèçìà. Ôðàêöèÿ À îòâåòñòâåííà çà òîêñè÷åñêîå äåéñòâèå. Ñèëó òîêñèíà äèôòåðèéíûõ êóëüòóð ìîæíî óñòàíàâëèâàòü «in vivo» íà ÷óâñòâèòåëüíûõ ê ýòîìó òîêñèíó ìîðñêèõ ñâèíêàõ. Dim äèôòåðèéíîãî ýêçîòîêñèíà — ìèíèìàëüíàÿ ñìåðòåëüíàÿ äîçà, ýòî ìèíèìàëüíîå êîëè÷åñòâî ÿäà, óáèâàþùåå ìîðñêóþ ñâèíêó ìàññîé 250 ã íà 4-é äåíü.
Íàëè÷èå ýêçîòîêñèíà ìîæíî îáíàðóæèòü òàêæå «in vitro» — íà ïëîòíîé ïèòàòåëüíîé ñðåäå. Ýòîò ìåòîä øèðîêî èñïîëüçóåòñÿ â ïðàêòè÷åñêîé ðàáîòå. Äèôòåðèéíûé ýêçîòîêñèí ìàëîóñòîé÷èâ. Îí áûñòðî ðàçðóøàåòñÿ ïîä âëèÿíèåì òåìïåðàòóðû, ñâåòà è êèñëîðîäà âîçäóõà. Ïîñëå äîáàâëåíèÿ ê òîêñèíó ôîðìàëèíà (0,3-0,4%) è âûäåðæèâàíèÿ åãî ïðè òåìïåðàòóðå 37-38° Ñ â òå÷åíèå íåñêîëüêèõ íåäåëü îí ïåðåõîäèò â àíàòîêñèí, êîòîðûé òåðÿåò ÿäîâèòîñòü, íî ñîõðàíÿåò àíòèãåííûå ñâîéñòâà òîêñèíà. Òîêñèíû, îáðàçóåìûå ðàçëè÷íûìè øòàììàìè, íå ðàçëè÷àþòñÿ ìåæäó ñîáîé è ìîãóò áûòü íåéòðàëèçîâàíû äèôòåðèéíûì àíòèòîêñèíîì * .
* (Â íàñòîÿùåå âðåìÿ óñòàíîâëåíî, ÷òî âñå áèîâàðû êîðèíåáàêòåðèé ìîãóò áûòü òîêñèãåííûìè è íåòîêñèãåííûìè.)
Àíòèãåííàÿ ñòðóêòóðà. Ó áàêòåðèé äèôòåðèè èìååòñÿ ïîâåðõíîñòíûé òåðìîëàáèëüíûé áåëêîâûé àíòèãåí è òèïîñïåöèôè÷åñêèé ïîëèñàõàðèäíûé Î-àíòèãåí. Êðîìå ýòîãî, ñðåäè êîðèíåáàêòåðèé ðàçëè÷àþò 19 ôàãîâàðîâ, êîòîðûå ó÷èòûâàþòñÿ ïðè èäåíòèôèêàöèè êóëüòóð. Ñ ïîìîùüþ ôàãîâàðîâ âûÿâëÿþò èñòî÷íèê çàáîëåâàíèÿ.
Óñòîé÷èâîñòü ê ôàêòîðàì îêðóæàþùåé ñðåäû. Âîçáóäèòåëè äèôòåðèèè ñðàâíèòåëüíî óñòîé÷èâû. Òåìïåðàòóðà 60° Ñ óáèâàåò èõ ÷åðåç 10-15 ìèí, 100° Ñ — ÷åðåç ìèíóòó.  ïëåíêå îíè âûäåðæèâàþò íàãðåâàíèå äî 90° Ñ. Íà ñâåðíóòîé ñûâîðîòêå ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå ñîõðàíÿþòñÿ äî 2 ìåñ, íà äåòñêèõ èãðóøêàõ — íåñêîëüêî ñóòîê. Íèçêèå òåìïåðàòóðû êîðèíåáàêòåðèé ïåðåíîñÿò õîðîøî. Ê âûñóøèâàíèþ âîçáóäèòåëè äèôòåðèè äîâîëüíî óñòîé÷èâû. Äåçèíôèöèðóþùèå âåùåñòâà (3% ðàñòâîð ôåíîëà, 1% ðàñòâîð ñóëåìû, 10% ðàñòâîð ïåðåêèñè âîäîðîäà) óáèâàþò ýòè áàêòåðèè â òå÷åíèå íåñêîëüêèõ ìèíóò.
Âîñïðèèì÷èâîñòü æèâîòíûõ.  åñòåñòâåííûõ óñëîâèÿõ æèâîòíûå äèôòåðèåé íå áîëåþò. Èç ýêñïåðèìåíòàëüíûõ æèâîòíûõ íàèáîëåå âîñïðèèì÷èâû ìîðñêèå ñâèíêè è êðîëèêè. Ïðè âíóòðèêîæíîì èëè ïîäêîæíîì çàðàæåíèè ó íèõ ðàçâèâàåòñÿ êàðòèíà òîêñèêîèíôåêöèè ñ îáðàçîâàíèåì íà ìåñòå ââåäåíèÿ âîñïàëåíèÿ, îòåêà, íåêðîçà.  íàäïî÷å÷íèêàõ íàáëþäàþòñÿ êðîâîèçëèÿíèÿ.
Èñòî÷íèêè çàáîëåâàíèÿ. Áîëüíûå ëþäè è áàêòåðèîíîñèòåëè.
Ïóòè ïåðåäà÷è. Âîçäóøíî-êàïåëüíûé ïóòü, êîíòàêòíî-áûòîâîé (÷åðåç ïîñóäó, èãðóøêè, êíèãè, ïîëîòåíöà è ò. ä.).
Çàáîëåâàíèå ó ÷åëîâåêà: 1) äèôòåðèÿ çåâà; 2) äèôòåðèÿ íîñà.
Ðåæå âîçíèêàåò äèôòåðèÿ òðàõåè, áðîíõîâ, ãëàç, óõà, âëàãàëèùà è äèôòåðèÿ ïîâðåæäåííîé êîæè.
Ïàòîãåíåç. Âõîäíûìè âîðîòàìè ÿâëÿþòñÿ ñëèçèñòûå îáîëî÷êè äûõàòåëüíûõ ïóòåé è ïîâðåæäåííàÿ êîæà. Ïîïàâ íà ñëèçèñòóþ îáîëî÷êó, âîçáóäèòåëè äèôòåðèè ðàçìíîæàþòñÿ â ìåñòå âíåäðåíèÿ è âûçûâàþò íåêðîç òêàíè. Îáðàçóåòñÿ ïëåíêà, òåñíî ñâÿçàííàÿ ñ ïîäëåæàùèìè òêàíÿìè. Íà ïîâåðõíîñòè ñëèçèñòîé ïîÿâëÿþòñÿ ãðÿçíî-ñåðûå èëè æåëòîâàòûå íàëåòû, ñîñòîÿùèå èç ðàçðóøåííîãî ýïèòåëèÿ, ôèáðèíà, ëåéêîöèòîâ è êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè. Ïðè ñíÿòèè ïëåíêè âàòíûì òàìïîíîì èëè øïàòåëåì ïîâåðõíîñòü ñëèçèñòîé ìîæåò êðîâîòî÷èòü.
 ïðîöåññå ðàçìíîæåíèÿ êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè â íåêðîòè÷åñêèõ ó÷àñòêàõ íàêàïëèâàåòñÿ ýêçîòîêñèí, êîòîðûé ìîæåò ïðèâåñòè ê îòåêó ñëèçèñòîé îáîëî÷êè è êëåò÷àòêè. Ñî ñëèçèñòîé îáîëî÷êè îòåê ìîæåò ðàñïðîñòðàíÿòüñÿ íà ãîðòàíü, áðîíõè è âûçâàòü ÿâëåíèÿ àñôèêñèè. Òîêñèí, öèðêóëèðóþùèé â êðîâè, èçáèðàòåëüíî ïîðàæàåò ñåðäå÷íóþ ìûøöó, íàäïî÷å÷íèêè è êëåòêè íåðâíîé òêàíè.
Äèôòåðèÿ — ýòî òîêñèêîèíôåêöèÿ. Òÿæåñòü ïðîöåññà çàâèñèò îò ñòåïåíè òîêñèãåííîñòè øòàììà è îò çàùèòíûõ ñèë îðãàíèçìà.
Èììóíèòåò. Íåâîñïðèèì÷èâîñòü îáóñëîâëèâàåòñÿ àíòèòîêñè÷åñêèì è àíòèáàêòåðèàëüíûì èììóíèòåòîì. Ãðóäíûå äåòè íå áîëåþò, òàê êàê ó íèõ èìååòñÿ ïàññèâíûé èììóíèòåò, ïåðåäàííûé îò ìàòåðè.
Î íàëè÷èè àíòèòîêñè÷åñêîãî èììóíèòåòà ñóäÿò ïî ðåàêöèè Øèêà. Äëÿ ïîñòàíîâêè ðåàêöèè 1 /40 Dlm (ëåòàëüíîé äîçû òîêñèíà äëÿ ìîðñêîé ñâèíêè), ñîäåðæàùåãîñÿ â 0,2 ìë èçîòîíè÷åñêîãî ðàñòâîðà íàòðèÿ õëîðèäà, ââîäÿò âíóòðèêîæíî â îáëàñòè ïðåäïëå÷üÿ. Ïðè îòñóòñòâèè â êðîâè àíòèòîêñèíà â ìåñòå ââåäåíèÿ ÷åðåç 24-48 ÷ ïîÿâëÿåòñÿ êðàñíîòà è ïðèïóõëîñòü (äî 2 ñì â äèàìåòðå). Ïðè íàëè÷èè àíòèòîêñèíà ïðèïóõëîñòè è êðàñíîòû íåò (èìåþùèéñÿ â êðîâè àíòèòîêñèí íåéòðàëèçîâàë ââåäåííûé òîêñèí).
Ïåðåíåñåííîå çàáîëåâàíèå îñòàâëÿåò èììóíèòåò. Îäíàêî â 6-7% ñëó÷àåâ íàáëþäàþòñÿ ïîâòîðíûå çàáîëåâàíèÿ.
Ïðîôèëàêòèêà. Ðàííÿÿ äèàãíîñòèêà. Èçîëÿöèÿ. Äåçèíôåêöèÿ. Âûÿâëåíèå íîñèòåëåé òîêñèãåííîé äèôòåðèéíîé ïàëî÷êè.
Ñïåöèôè÷åñêàÿ ïðîôèëàêòèêà îñóùåñòâëÿåòñÿ ââåäåíèåì àíàòîêñèíà.  ÑÑÑÐ ïðîâîäÿò îáÿçàòåëüíóþ âàêöèíàöèþ äåòåé âàêöèíîé ÀÊÄÑ — ýòî êîìïëåêñíàÿ âàêöèíà, â êîòîðóþ âõîäÿò äèôòåðèéíûé è ñòîëáíÿ÷íûé àíàòîêñèí è âçâåñü óáèòûõ êîêëþøíûõ ïàëî÷åê. Âàêöèíèðóþò äåòåé ñ 5-6 ìåñÿöåâ ñ ïîñëåäóþùåé ðåâàêöèíàöèåé. Äëÿ ðåâàêöèíàöèè ââîäÿò âàêöèíó áåç êîêëþøíûõ ïàëî÷åê.
Ñïåöèôè÷åñêîå ëå÷åíèå. Ïðèìåíÿþò ïðîòèâîäèôòåðèéíóþ àíòèòîêñè÷åñêóþ ñûâîðîòêó. Äîçà è êðàòíîñòü îïðåäåëÿåòñÿ ëå÷àùèì âðà÷îì, ââîäÿò òàêæå àíòèìèêðîáíûå ïðåïàðàòû.
Êîíòðîëüíûå âîïðîñû
1. Êàêîâà ìîðôîëîãèÿ êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè è êàêèå èìåþòñÿ áèîâàðû?
2. Íà êàêèõ ñðåäàõ âûðàùèâàþò áàêòåðèè äèôòåðèè è êàêîâ õàðàêòåð ðîñòà?
3. Îòíîøåíèå ê êàêîìó óãëåâîäó ïîçâîëÿåò îòëè÷èòü áèîâàð gravis îò äðóãèõ áèîâàðîâ äèôòåðèè?
4. Êàêîâ ïóòü ïåðåäà÷è è ãäå ÷àùå ëîêàëèçóåòñÿ âîçáóäèòåëü äèôòåðèè ó áîëüíîãî?
5. Êàêîâû ñïåöèôè÷åñêàÿ ïðîôèëàêòèêà è ñïåöèôè÷åñêîå ëå÷åíèå äèôòåðèè?
Ìèêðîáèîëîãè÷åñêîå èññëåäîâàíèå
Öåëü èññëåäîâàíèÿ: âûäåëåíèå âîçáóäèòåëÿ äëÿ ïîñòàíîâêè äèàãíîçà. Âûÿâëåíèå áàêòåðèîíîñèòåëåé äèôòåðèè ïî ýïèäåìèîëîãè÷åñêèì ïîêàçàíèÿì. Âûÿâëåíèå ýêçîòîêñèíà ó âûäåëåííîé êóëüòóðû.
1. Îòäåëÿåìîå ñëèçèñòîé îáîëî÷êè çåâà.
2. Îòäåëÿåìîå ñëèçèñòîé îáîëî÷êè íîñà.
3. Îòäåëÿåìîå ñëèçèñòîé îáîëî÷êè ãëàçà.
5. Îòäåëÿåìîå ñëèçèñòîé îáîëî÷êè âëàãàëèùà.
6. Îòäåëÿåìîå ðàíû.
Ìàòåðèàë äëÿ èññëåäîâàíèÿ çàâèñèò îò ëîêàëèçàöèè ïðîöåññà.
Ñïîñîáû ñáîðà ìàòåðèàëà
Ïðè ëþáîé ëîêàëèçàöèè ïðîöåññà îáÿçàòåëüíî èññëåäóåò ñëèçèñòóþ çåâà è íîñà. Ìàòåðèàë ñîáèðàþò âàòíûì òàìïîíîì, äëÿ ÷åãî èñïîëüçóþò ìåòàëëè÷åñêóþ ïðîâîëîêó, æåëàòåëüíî àëþìèíèåâóþ, íà îäèí êîíåö êîòîðîé ïëîòíî íàêðó÷èâàþò âàòó, çàòåì òàìïîí ìîíòèðóþò â êîðêîâóþ ïðîáêó, ïîìåùàþò â ïðîáèðêó è ñòåðèëèçóþò â ïå÷è Ïàñòåðà ïðè òåìïåðàòóðå 160° Ñ 1 òàìïîí òå÷åíèå ÷àñà èëè â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå 112° Ñ.
Ïðèìå÷àíèÿ. 1. Ìàòåðèàë ñîáèðàþò íàòîùàê ëèáî íå ðàíüøå ÷åì ÷åðåç 2 ÷ ïîñëå åäû è íå ðàíåå ÷åì ÷åðåç 4 äíÿ ïîñëå ëå÷åíèÿ àíòèáèîòèêàìè èëè äðóãèìè àíòèáàêòåðèàëüíûìè ñðåäñòâàìè. 2. Åñëè ìàòåðèàë áåðóò èç çåâà è íîñà, òî ïðîáèðêè ñ îáîèìè òàìïîíàìè íàäïèñûâàþò è ñâÿçûâàþò âìåñòå. Ïîñåâû äåëàþò ðàçäåëüíî è èññëåäîâàíèå ìàòåðèàëà èç êàæäîãî òàìïîíà âåäóò êàê ñàìîñòîÿòåëüíóþ ðàáîòó. 3 Ìàòåðèàë, ñîáðàííûé ñóõèì òàìïîíîì, äîëæåí áûòü ïîñåÿí íå ïîçäíåå ÷åì ÷åðåç 2-3 ÷ ïîñëå çàáîðà. Ïðè íåîáõîäèìîñòè òðàíñïîðòèðîâêè ñîáðàííîãî ìàòåðèàëà òàìïîí ïðåäâàðèòåëüíî ñìà÷èâàþò 5% ðàñòâîðîì ãëèöåðèíà â èçîòîíè÷åñêîì ðàñòâîðå íàòðèÿ õëîðèäà.
Ïåðâûé äåíü èññëåäîâàíèÿ
×àøêè âûíèìàþò èç òåðìîñòàòà è ïðîñìàòðèâàþò. Ðîñò áàêòåðèé íà ñðåäå Êëàóáåðãà ìîæåò áûòü çàìåäëåí èç-çà íàëè÷èÿ èíãèáèòîðîâ â ñðåäå.  ýòîì ñëó÷àå ÷àøêè ñòàâÿò â òåðìîñòàò åùå íà 24 ÷.
×àøêè âûíèìàþò èç òåðìîñòàòà, ïðîñìàòðèâàþò èõ ñ ïîìîùüþ ëóïû èëè ñòåðåîñêîïè÷åñêîãî ìèêðîñêîïà. Ïðè íàëè÷èè ïîäîçðèòåëüíûõ êîëîíèé ÷àñòü èõ ïîä êîíòðîëåì ñòåðåîñêîïè÷åñêîãî ìèêðîñêîïà âûäåëÿþò íà àãàð ñ 25% ñûâîðîòêîé è íà ñòîëáèê ñî ñðåäîé Ïèçó äëÿ îïðåäåëåíèÿ ôåðìåíòà öèñòèíàçû. Èç äðóãîé ÷àñòè êîëîíèé ñòàâÿò ïðîáó íà òîêñèãåííîñòü.
Ïðè ìèêðîñêîïè÷åñêîì èññëåäîâàíèè êîëîíèé, ñíÿòûõ ñî ñðåäû Êëàóáåðãà, êîðèíåáàêòåðèè äèôòåðèè òåðÿþò ñâîþ ñïåöèôè÷íîñòü: îòñóòñòâóåò çåðíèñòîñòü, èçìåíÿåòñÿ âåëè÷èíà, ðàñïîëîæåíèå ñîõðàíÿåòñÿ. Ïðè ïîñåâå èõ íà ñðåäû ñ ñûâîðîòêîé ìîðôîëîãè÷åñêàÿ ñïåöèôè÷íîñòü âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè âîññòàíàâëèâàåòñÿ.
Ïðîáà íà íàëè÷èå ôåðìåíòà öèñòèíàçû è îïðåäåëåíèå òîêñèãåííîñòè ÿâëÿþòñÿ îáÿçàòåëüíûìè ïðè èäåíòèôèêàöèè âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè. Åñëè ðåçóëüòàò ýòèõ îïûòîâ, ïðîâåäåííûõ ñ ÷àñòüþ êîëîíèé ñî ñðåäû Êëàóáåðãà, íåäîñòàòî÷íî ÷åòêèé èëè îòðèöàòåëüíûé, òî îïûò ïîâòîðÿþò, èñïîëüçóÿ âûäåëåííóþ ÷èñòóþ êóëüòóðó.
Ïðîáà íà öèñòèíàçó. Ïðîâîäÿò ïîñåâ èññëåäóåìîé êóëüòóðû óêîëîì â öåíòð ñòîëáèêà ñðåäû Ïèçó. Ïðè ïîëîæèòåëüíîé ðåàêöèè ÷åðåç 18-24 ÷ ïî õîäó óêîëà íàáëþäàåòñÿ ïî÷åðíåíèå, à âîêðóã ÷åðíîãî ñòåðæíÿ îáðàçóåòñÿ òåìíîå îáëà÷êî; ïî÷åðíåíèå ïðîèñõîäèò â ðåçóëüòàòå òîãî, ÷òî ôåðìåíò öèñòèíàçà ðàñùåïëÿåò öèñòèí, âõîäÿùèé â ñîñòàâ ñðåäû Ïèçó, è îñâîáîäèâøàÿñÿ ñåðà âñòóïàåò â ðåàêöèþ ñ àöåòàòîì ñâèíöà — îáðàçóåòñÿ ñóëüôèò ñâèíöà ÷åðíîãî öâåòà. Äèôòåðîèäû è ëîæíîäèôòåðèéíûå ïàëî÷êè íå ñîäåðæàò ôåðìåíò öèñòèíàçó, ïîýòîìó ïðè ðîñòå èõ íà ñðåäå Ïèçó öâåò ñðåäû íå èçìåíÿåòñÿ.
Îïðåäåëåíèå ýêçîòîêñèíà. Ïðîâîäÿò ìåòîäîì äèôôóçíîé ïðåöèïèòàöèè â ãåëå. Ìåòîä îñíîâàí íà âçàèìîäåéñòâèè òîêñèíà ñ àíòèòîêñèíîì.  òåõ ó÷àñòêàõ àãàðà, ãäå ýòè êîìïîíåíòû âçàèìîäåéñòâóþò, îáðàçóåòñÿ ïðåöèïèòàò â âèäå çàêðóãëåííûõ ëèíèé.
Ìåòîäèêà îïðåäåëåíèÿ: â ÷àøêè Ïåòðè ðàçëèâàþò ðàñòîïëåííûé è îõëàæäåííûé äî 50° Ñ àãàð Ìàðòåíà ðÍ 7,8 (íà àãàðå Ìàðòåíà ëó÷øå ïðîäóöèðóåòñÿ ýêçîòîêñèí). Êîëè÷åñòâî àãàðà â ÷àøêå äîëæíî áûòü íå áîëåå 12-15 ìë, ÷òîáû ñîõðàíèòü ïðîçðà÷íîñòü, — â òîëñòîì ñëîå ëèíèè ïðåöèïèòàöèè ïëîõî âèäíû. Ïîñëå çàñòûâàíèÿ àãàðà íàêëàäûâàþò ïîëîñêó ñòåðèëüíîé ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãè, ñìî÷åííîé ïðîòèâîäèôòåðèéíîé àíòèòîêñè÷åñêîé ñûâîðîòêîé.
Èñïûòóåìóþ êóëüòóðó çàñåâàþò «áëÿøêàìè». Ïîñåâ ïðîèçâîäÿò ïåòëåé. Äèàìåòð áëÿøåê 0,8-1,0 ñì. Ðàññòîÿíèå áëÿøåê îò êðàÿ ïîëîñîê áóìàãè 0,5-0,7 ñì, ìåæäó äâóìÿ áëÿøêàìè èñïûòóåìîé êóëüòóðû çàñåâàþò áëÿøêè çàâåäîìî òîêñèãåííîãî øòàììà. Èñïûòóåìóþ êóëüòóðó ñ÷èòàþò òîêñèãåííîé, åñëè ëèíèè ïðåöèïèòàöèè ÷åòêè è ñëèâàþòñÿ ñ ëèíèÿìè ïðåöèïèòàöèè êîíòðîëüíîãî (òîêñèãåííîãî) øòàììà. Åñëè ëèíèè ïðåöèïèòàöèè ïåðåêðåùèâàþòñÿ ñ ëèíèÿìè êîíòðîëüíîãî øòàììà èëè îòñóòñòâóþò, âûäåëåííóþ êóëüòóðó ñ÷èòàþò íåòîêñèãåííîé (ðèñ. 50).
Ðèñ. 50. Âûÿâëåíèå ýêçîòîêñèíà C.Diphtheriae ìåòîäîì äèôôóçíîé ïðåöèïèòàöèè â àãàðå. 1 — áëÿøêè íåòîêñèãåííîãî øòàììà (ëèíèè ïðåöèïèòàöèè ïåðåêðåùèâàþòñÿ); 2 — áëÿøêè òîêñèãåííîãî øòàììà (ëèíèè ïðåöèïèòàöèè ñîåäèíÿþòñÿ)
Ïðèãîòîâëåíèå ïîëîñîê áóìàãè. Èç ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãè íàðåçàþò ïîëîñêè ðàçìåðîì 1,5×8 ñì, çàâîðà÷èâàþò ïî íåñêîëüêî øòóê â áóìàãó è ñòåðèëèçóþò â àâòîêëàâå ïðè òåìïåðàòóðå 120° Ñ â òå÷åíèå 30 ìèí. Ïåðåä ïîñòàíîâêîé îïûòà ñòåðèëüíûì ïèíöåòîì âûíèìàþò îäíó ïîëîñêó, óêëàäûâàþò åå â ñòåðèëüíóþ ÷àøêó Ïåòðè è ñìà÷èâàþò ïðîòèâîäèôòåðèéíîé àíòèòîêñè÷åñêîé ñûâîðîòêîé. Ïðåäâàðèòåëüíî ñûâîðîòêó ðàçâîäÿò òàê, ÷òîáû â 1 ìë ñîäåðæàëîñü 500 ÀÅ (àíòèòîêñè÷åñêèõ åäèíèö). Áóìàæêó ñìà÷èâàþò 0,25 ìë ñûâîðîòêè (125 ÀÅ) è ïîìåùàþò íà ïîâåðõíîñòü ñðåäû. Çàòåì äåëàþò ïîñåâû óêàçàííûì âûøå ñïîñîáîì. Âñå ïîñåâû ñòàâÿò â òåðìîñòàò. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ïðîèçâîäÿò ÷åðåç 18-24 è 48 ÷.
Âûíèìàþò ïîñåâû èç òåðìîñòàòà, ó÷èòûâàþò ðåçóëüòàò. Äåëàþò ìàçêè èç êóëüòóðû, âûðîñøåé íà ñðåäå ñ ñûâîðîòêîé, è îêðàøèâàþò èõ ñèíèì Ëåôôëåðà.
Íàëè÷èå â ìàçêàõ õàðàêòåðíûõ ïî ìîðôîëîãèè ïàëî÷åê, ÷åðíîãî ñ îáëà÷êîì ñòåðæíÿ â ñðåäå Ïèçó è ëèíèé ïðåöèïèòàöèè â àãàðå ïîçâîëÿåò äàòü ïðåäâàðèòåëüíûé îòâåò: «Îáíàðóæåíû êîðèíåáàêòåðèè äèôòåðèè». Èññëåäîâàíèå ïðîäîëæàþò. Ïðè îòñóòñòâèè ëèíèé ïðåöèïèòàöèè â àãàðå èëè èõ íåäîñòàòî÷íîé ÷åòêîñòè èññëåäîâàíèå íà òîêñèãåííîñòü îáÿçàòåëüíî ïîâòîðÿþò ñ âûäåëåííîé ÷èñòîé êóëüòóðîé.
Äëÿ îêîí÷àòåëüíîé èäåíòèôèêàöèè âûäåëåííîé êóëüòóðû è îïðåäåëåíèÿ áèîâàðà âîçáóäèòåëÿ ïðîèçâîäÿò ïîñåâ íà ãëþêîçó, ñàõàðîçó, êðàõìàë è áóëüîí ñ ìî÷åâèíîé (äëÿ âûÿâëåíèÿ ôåðìåíòà óðåàçû). Ïîñåâ íà ñðåäû äåëàþò îáû÷íûì ñïîñîáîì.
Ïðîáà íà óðåàçó. Âûäåëåííóþ êóëüòóðó çàñåâàþò íà áóëüîí ñ ìî÷åâèíîé è èíäèêàòîðîì (êðåçîëîâûé êðàñíûé) è ñòàâÿò â òåðìîñòàò. Óæå ÷åðåç 30-40 ìèí ìîæíî ó÷èòûâàòü ðåçóëüòàò: ïðè ïîñåâå èñòèííûõ âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè öâåò ñðåäû íå èçìåíÿåòñÿ, òàê êàê îíè íå ñîäåðæàò óðåàçó. Ïñåâäîäèôòåðèéíûå ïàëî÷êè ðàñùåïëÿþò ìî÷åâèíó è èçìåíÿþò èíäèêàòîð — ñðåäà ïðèîáðåòàåò ìàëèíîâî-êðàñíûé öâåò.
Ïðîèçâîäÿò ó÷åò ðåçóëüòàòîâ (òàáë. 50).
Òàáëèöà 50. Ôåðìåíòàòèâíûå ñâîéñòâà âûäåëåííûõ âîçáóäèòåëåé
1. Êàêîé ìàòåðèàë èññëåäóþò äëÿ âûÿâëåíèÿ âîçáóäèòåëÿ äèôòåðèè?
2. Êàê ñîáèðàþò ìàòåðèàë äëÿ èññëåäîâàíèÿ íà äèôòåðèþ èç çåâà è íîñà?
3. ×òî íóæíî ñäåëàòü ñ òàìïîíîì, åñëè ñîáðàííûé ìàòåðèàë íåîáõîäèìî òðàíñïîðòèðîâàòü?
4. Ïðè ïîìîùè êàêîãî ïðèáîðà èçó÷àþò êîëîíèè íà ñðåäå Êëàóáåðãà?
5. Êàêèå èññëåäîâàíèÿ ïðîâîäÿò äëÿ îêîí÷àòåëüíîé èäåíòèôèêàöèè âûäåëåííîé êóëüòóðû?
6. Êàêèìè ìåòîäàìè îïðåäåëÿþò òîêñèãåííîñòü êîðèíåáàêòåðèé äèôòåðèè?
1. Âîçüìèòå ó ïðåïîäàâàòåëÿ ïðîâîëîêó è âàòó è ïðèãîòîâüòå 10 òàìïîíîâ, âìîíòèðóéòå èõ â êîðêîâóþ ïðîáêó, âñòàâüòå â ïðîáèðêó è ïðîñòåðèëèçóéòå.
Âíèìàíèå! Ïåðåä ñòåðèëèçàöèåé ïðîâåðüòå, äîñòàòî÷íî ëè ïëîòíî íàêðó÷åí òàìïîí.
2. Âîçüìèòå ó ïðåïîäàâàòåëÿ ñòåðèëüíûå òàìïîíû è ïðîèçâåäèòå çàáîð ìàòåðèàëà äðóã ó äðóãà èç çåâà è íîñà (ðàçíûìè òàìïîíàìè).
3. Èçó÷èòå ïî òàáë. 49 ñâîéñòâà âîçáóäèòåëåé äèôòåðèè è áëèçêèõ ê íèì êîðèíåáàêòåðèé.
4. Ïîñòàâüòå ïðîáó íà òîêñèãåííîñòü. Áëÿøêè ñäåëàéòå ïåòëåé áåç êóëüòóðû.
5. Çàðèñóéòå õîä èññëåäîâàíèÿ è ïîëîæèòåëüíûé è îòðèöàòåëüíûé ðåçóëüòàò ïðîáû íà òîêñèãåííîñòü.
Òåëëóðîâàÿ ñðåäà Êëàóáåðãà: ïåðâàÿ ñìåñü — ïðåäâàðèòåëüíî çà 1,5 ìåñ ãîòîâÿò ñìåñü èç 20 ìë áàðàíüåé èëè ëîøàäèíîé êðîâè è 10 ìë ãëèöåðèíà.  äåíü ïðèãîòîâëåíèÿ ñðåäû ãîòîâÿò äâå äðóãèå ñìåñè; âòîðàÿ ñìåñü — 50 ìë ÌÏÀ ðÍ 7,5 ðàñòàïëèâàþò è îõëàæäàþò äî òåìïåðàòóðû 50° Ñ, ïîñëå ÷åãî ïðèáàâëÿþò 2,5 ìë ïåðâîé ñìåñè; òðåòüÿ ñìåñü — ñìåøèâàþò 17 ìë áàðàíüåé êðîâè è 33 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû (ñìåñü ïðèãîòàâëèâàþò ñòåðèëüíî), ïîäîãðåâàþò íà âîäÿíîé áàíå äî òåìïåðàòóðû 50° Ñ. Ñîåäèíÿþò âòîðóþ è òðåòüþ ñìåñè, ïðèáàâëÿþò 4 ìë 1% ðàñòâîðà òåëëóðèòà êàëèÿ Ê2ÒåÎ3, áûñòðî âñå ïåðåìåøèâàþò è ðàçëèâàþò â ÷àøêè. Ñðåäà ïðîçðà÷íàÿ, èìååò öâåò êðàñíîãî âèíà.
Ñðåäà Ïèçó. Ê 90 ìë ðàñïëàâëåííîãî 2% ÌÏÀ (ðÍ 7,6) äîáàâëÿþò 2 ìë ðàñòâîðà öèñòèíà (1% ðàñòâîð öèñòèíà â 0,1 í. ðàñòâîðå ãèäðîêñèäà íàòðèÿ), òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò è äîáàâëÿþò òàêîé æå îáúåì 0,1 í. ðàñòâîðà ñåðíîé êèñëîòû. Ñðåäó ñòåðèëèçóþò 30 ìèí ïðè òåìïåðàòóðå 112° Ñ. Ê ðàñïëàâëåííîé è îõëàæäåííîé äî 50° Ñ ñðåäå äîáàâëÿþò 1 ìë 10% ðàñòâîðà àöåòàòà ñâèíöà, ñòåðèëèçîâàííîãî äâóêðàòíî òåêó÷èì ïàðîì, ïåðåìåøèâàþò è äîáàâëÿþò 9 ìë íîðìàëüíîé ëîøàäèíîé ñûâîðîòêè. Ñðåäó ñòåðèëüíî ðàçëèâàþò â ìàëåíüêèå ïðîáèðêè ïî 2 ìë. Ïîñåâ ïðîèçâîäÿò óêîëîì.
Ñðåäà Áóíèíà. Ñóõóþ õèíîçîëüíóþ ñðåäó äîáàâëÿþò ê 100 ìë õîëîäíîé âîäû (ðÍ 7,6-7,8), ðàçìåøèâàþò è íàãðåâàþò íà ñëàáîì îãíå äî ðàñïëàâëåíèÿ àãàðà (ïî ïðîïèñè íà ýòèêåòêå). Çàòåì ñðåäó êèïÿòÿò 2-3 ìèí äî îáðàçîâàíèÿ ïåíû, ïîñëå ÷åãî ñðåäó îñòóæàþò äî 50° Ñ è äîáàâëÿþò 5-10 ìë ñòåðèëüíîé äåôèáðèíèðîâàííîé êðîâè. Ñðåäó ïåðåìåøèâàþò è ðàçëèâàþò â ÷àøêè Ïåòðè. Ãîòîâóþ ñðåäó ìîæíî ñîõðàíÿòü 3-4 äíÿ ïðè òåìïåðàòóðå 4-10°.
Ñðåäà Òèíñäàëÿ. Ê 100 ìë 2% ïèòàòåëüíîãî àãàðà, ðàñïëàâëåííîãî è îõëàæäåííîãî äî 50° Ñ, äîáàâëÿþò: 1) 12 ìë 1% ðàñòâîðà öèñòèíà íà 0,1 í. ðàñòâîðå ñåðíîé êèñëîòû; 2) 12 ìë 1% ðàñòâîðà ãèäðîêñèäà íàòðèÿ; 3) 1,8 ìë 2% ðàñòâîðà òåëëóðèòà êàëèÿ; 4) 1,8 ìë 2,5% ðàñòâîðà ãèïîñóëüôèòà íàòðèÿ, 20 ìë íîðìàëüíîé ëîøàäèíîé èëè áû÷üåé ñûâîðîòêè. Ïîñëå äîáàâëåíèÿ êàæäîãî èíãðåäèåíòà ñðåäó òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò. ×àøêè ñî ñðåäîé õðàíÿò 3-4 äíÿ ïðè 10° Ñ.
Источник: http://biologylib.ru/books/item/f00/s00/z0000015/st039.shtml
Corynebacterium diphtheriae выделен в чистой культуре Леффлером в 1884 г.
Размеры дифтерийной палочки: длина 1—6 мкм, толщина 0,3— 0,8 мкм. Отличительной особенностью возбудителя дифтерии является многообразие форм — наряду с длинными изогнутыми, изящными «типичными» палочками микробов встречаются короткие толстые с колбовидными вздутиями на концах, иногда коккообразные клетки, что придает микробу сходство с булавой. В колбовидных вздутиях часто находят волютиновые зерна (тельца Бабеша-Эрнета).
Характерен общий вид препарата, особенно если мазок взят с большим количеством микробов. Микробы лежат большими скоплениями и напоминают пакет булавок. В окрашенных мазках могут быть расположены попарно, под острым или прямым углом друг к другу, напоминая римскую цифру V. Дифтерийные микробы неподвижны, спор не образуют, жгутиков не имеют, грамположительные, хорошо окрашиваются основными анилиновыми красками, причем особенно интенсивно окрашиваются волютиновые зерна. При окрашивании по Кецссеру характерной особенностью является то, что зерна волютина окрашиваются в сине-черный цвет, контрастирующий со светло-коричневой окраской всей микробной клетки.
Биология возбудителя дифтерии
Биология: дифтерийные микробы хорошо развиваются при свободном доступе кислорода; растут при температуре от 15 до 40 °С. Могут расти на обычных питательных средах, но лучше и с характерной морфологией развиваются на средах, содержащих кровь или сыворотку любого вида животного. На этих средах дифтерийные бактерии вырастают уже через 8—10—12 ч.
- свернутая лошадиная сыворотка (среда РУ);
- среда Леффлера (3 части сыворотки + 1 часть мясного бульона с 1% виноградного сахара, 1% пептона);
- теллуритовые среды.
Очень характерен общий вид роста дифтерийных микробов в пробирках на скошенных свернутых сывороточных средах: колонии не сливаются вместе, вся культура представляется усеянной зернышками, напоминая шагреневую кожу. Колонии круглые, гладкие или слегка зернистые, непрозрачные с полупрозрачной периферией, края ровные, но впоследствии становятся извилистыми или даже зазубренными. На теллуритовых средах дифтерийные палочки образуют темно-серые или черные колонии вследствие восстановления теллурита до металлического теллура. Восстановление происходит внутри бактериальной клетки.
Типы дифтерийных микробов.
На основании культуральных свойств различают 3 типа дифтерийных микробов:
- gravis (тяжелый);
- mitis (средний);
- intermedius (промежуточный).
Тип гравис дает зернистый осадок и пленку на бульоне, на плотных средах образует плоские матовые колонии неправильных очертаний, напоминающие маргаритку. Тип митис равномерно мутит бульон и образует выпуклые полупрозрачные колонии. Третий тип обладает некоторыми свойствами первого и второго типов. Часто встречаются также атипичные формы. У дифтерийных бактерий, как и у других микроорганизмов, наблюдаются:
- гладкие (S) формы колоний;
- шероховатые (R) формы;
- промежуточные (RS).
У высокотоксичных штаммов обычно преобладают R-формы. Дифтерийная палочка вырабатывает кислоту без газообразования в средах с глюкозой, мальтозой и галактозой, но не с лактозой, сахарозой и маннитом. Сбраживание крахмала и гликогена считают характерной особенностью типа гравис. Многие штаммы дают гемолиз на кровяном агаре и лизируют эритроциты, добавленные к культуре.
Дифтерийные бактерии чувствительны к дезинфицирующим средствам: 10%-ная перекись водорода убивает их в течение 3 мин; 1%-ная сулема, 5%-ная карболовая кислота, 50— 60%-ный алкоголь — в течение 1 мин. Низкие температуры (до -190 °С) не убивают дифтерийные бактерии длительное время. Высокая температура приводит к быстрой их гибели. Под действием прямого солнечного света палочки дифтерии гибнут в течение нескольких дней. В пыли они сохраняют жизнедеятельность до 5 недель, в воде и молоке до 6—20 дней. В трупах сохраняются до 2 недель.
Серотипы дифтерийных бактерий
Серотипы. Дифтерийные бактерии гетерогенны по антигенной структуре, но все вырабатывают одинаковый токсин. Серологическая гетерогенность наблюдается в пределах одного типа. Между 3 типами — гравис, митис и интермедиус — серологическая связь отсутствует. Токсин, продуцируемый всеми 3 типами дифтерийных микробов, тождествен и хорошо нейтрализуется обычными противодифтерийными сыворотками. Среди дифтерийных микробов имеются токсичные и нетоксичные штаммы. Дифтерию вызывают только токсичные штаммы, обладающие способностью продуцировать экзотоксины. Степень токсичности дифтерийных микробов может быть различной. Единицей измерения силы токсина служит минимальная смертельная доза — наименьшее количество токсина, убивающее морскую свинку массой 250 г в течение 3—4 суток. Кроме экзотоксина дифтерийная палочка продуцирует дермонекроток-син, гемолизин, нейраминидазу и гиалуронидазу.
Источник: http://alexmed.info/2017/09/11/7406/
1. Морфология возбудителя дифтерии
2. Биология возбудителя дифтерии
3. Серотипы дифтерийных бактерий
1. Возбудитель дифтерии Corynebacterium diphtheriae выделен в чистой культуре Леффлером в 1884 г.
Размеры дифтерийной палочки: длина 1—6 мкм, толщина 0,3— 0,8 мкм. Отличительной особенностью возбудителя дифтерии является многообразие форм — наряду с длинными изогнутыми, изящными «типичными» палочками микробов встречаются короткие толстые с колбовидными вздутиями на концах, иногда коккообразные клетки, что придает микробу сходство с булавой. В колбовидных вздутиях часто находят волютиновые зерна (тельца Бабеша-Эрнета).
Характерен общий вид препарата, особенно если мазок взят с большим количеством микробов. Микробы лежат большими скоплениями и напоминают пакет булавок. В окрашенных мазках могут быть расположены попарно, под острым или прямым углом друг к другу, напоминая римскую цифру V. Дифтерийные микробы неподвижны, спор не образуют, жгутиков не имеют, грамположительные, хорошо окрашиваются основными анилиновыми красками, причем особенно интенсивно окрашиваются волютиновые зерна. При окрашивании по Кецссеру характерной особенностью является то, что зерна волютина окрашиваются в сине-черный цвет, контрастирующий со светло-коричневой окраской всей микробной клетки.
2. Биология: дифтерийные микробы хорошо развиваются при свободном доступе кислорода; растут при температуре от 15 до 40 °С. Могут расти на обычных питательных средах, но лучше и с характерной морфологией развиваются на средах, содержащих кровь или сыворотку любого вида животного. На этих средах дифтерийные бактерии вырастают уже через 8—10—12 ч.
• свернутая лошадиная сыворотка (среда РУ);
• среда Леффлера (3 части сыворотки + 1 часть мясного бульона с 1% виноградного сахара, 1% пептона);
Очень характерен общий вид роста дифтерийных микробов в пробирках на скошенных свернутых сывороточных средах: колонии не сливаются вместе, вся культура представляется усеянной зернышками, напоминая шагреневую кожу. Колонии круглые, гладкие или слегка зернистые, непрозрачные с полупрозрачной периферией, края ровные, но впоследствии становятся извилистыми или даже зазубренными. На теллуритовых средах дифтерийные палочки образуют темно-серые или черные колонии вследствие восстановления теллурита до металлического теллура. Восстановление происходит внутри бактериальной клетки.
Типы дифтерийных микробов. На основании культуральных свойств различают 3 типа дифтерийных микробов:
Тип гравис дает зернистый осадок и пленку на бульоне, на плотных средах образует плоские матовые колонии неправильных очертаний, напоминающие маргаритку. Тип митис равномерно мутит бульон и образует выпуклые полупрозрачные колонии. Третий тип обладает некоторыми свойствами первого и второго типов. Часто встречаются также атипичные формы. У дифтерийных бактерий, как и у других микроорганизмов, наблюдаются:
• гладкие (S) формы колоний;
• шероховатые (R) формы;
У высокотоксичных штаммов обычно преобладают R-формы. Дифтерийная палочка вырабатывает кислоту без газообразования в средах с глюкозой, мальтозой и галактозой, но не с лактозой, сахарозой и маннитом. Сбраживание крахмала и гликогена считают характерной особенностью типа гравис. Многие штаммы дают гемолиз на кровяном агаре и лизируют эритроциты, добавленные к культуре.
Дифтерийные бактерии чувствительны к дезинфицирующим средствам: 10%-ная перекись водорода убивает их в течение 3 мин; 1%-ная сулема, 5%-ная карболовая кислота, 50— 60%-ный алкоголь — в течение 1 мин. Низкие температуры (до -190 °С) не убивают дифтерийные бактерии длительное время. Высокая температура приводит к быстрой их гибели. Под действием прямого солнечного света палочки дифтерии гибнут в течение нескольких дней. В пыли они сохраняют жизнедеятельность до 5 недель, в воде и молоке до 6—20 дней. В трупах сохраняются до 2 недель.
3. Серотипы. Дифтерийные бактерии гетерогенны по антигенной структуре, но все вырабатывают одинаковый токсин. Серологическая гетерогенность наблюдается в пределах одного типа. Между 3 типами — гравис, митис и интермедиус — серологическая связь отсутствует. Токсин, продуцируемый всеми 3 типами дифтерийных микробов, тождествен и хорошо нейтрализуется обычными противодифтерийными сыворотками. Среди дифтерийных микробов имеются токсичные и нетоксичные штаммы. Дифтерию вызывают только токсичные штаммы, обладающие способностью продуцировать экзотоксины. Степень токсичности дифтерийных микробов может быть различной. Единицей измерения силы токсина служит минимальная смертельная доза — наименьшее количество токсина, убивающее морскую свинку массой 250 г в течение 3—4 суток. Кроме экзотоксина дифтерийная палочка продуцирует дермонекроток-син, гемолизин, нейраминидазу и гиалуронидазу.
Источник: http://studfiles.net/preview/3882413/page:48/
38. Дифтерия. Морфология и культуральные свойства. Патогенез дифтерии
Возбудитель относится к роду Carinobakterium, виду C. difteria.
Это тонкие палочки, прямые или слегка изогнутые, грамположительные. Для них характерен выраженный полиморфизм. На концах булавовидные утолщения. В мазках бактерии располагаются под углом в виде V или X.
Спор и капсул не образуют. Неподвижны. Имеют фимбрии. Являются факультативными анаэробами или аэробами.
Выделяясь во внешнюю среду со слюной, пленками, дифтерийные палочки способны сохранять жизнеспособность на предметах в течение нескольких дней. Хорошо переносят высушивание.
Каринобактерии требовательны к питательным средам, для их культивирования применяются сывороточные среды или среды с добавлением крови. Используется среда Ру (свернутая сыворотка). Для выделения используются элективные питательные среды с добавлением толурита калия. Каринобактерии подразделяются на три биовара: gravis, mitisintermedius.
1) ворсинки, фимбрии или пили;
2) колонизация и инвазия (за счет ферментов);
3) корд-фактор (нарушает фосфорилирование процессов дыхания клеток макроорганизма);
4) ведущий фактор – экзотоксин.
Пути передачи – воздушно-капельный, контактно-бытовой.
Возбудитель проникает через слизистые оболочки ротоглотки, реже – глаз, половых органов, кожу, раневую поверхность.
Сам возбудитель остается на месте входных ворот инфекции, а патогенез и клиническая картина определены действием экзотоксина, который оказывает общее и местное действие.
Патоморфологическим проявлением взаимодействия макро– и микроорганизма при дифтерии является фибринозное воспаление. В выходящем из сосудов экссудате обнаруживается фибриноген, при свертывании которого на поверхности слизистой оболочки образуются серовато-белого цвета пленчатые налеты, плотно спаянные с окружающей тканью. Они тяжело снимаются, при их отрыве обнажается эрозийная поверхность. Разрастание этих пленок приводят к развитию истинного крупа.
Затем в воспалительный процесс вовлекаются:
1) регионарные лимфатические узлы (лимфадениты);
3) сердце (параличу сердечной мышцы);
4) кора надпочечников;
6) периферическая нервная система – полиневриты, парезы;
7) иммунная система (на 5—7-й дни антитела отсутствуют).
Сила токсина измеряется в DLM. 1 DLM – это минимальное количество токсина, которое при подкожном введении морской свинке весом 250 г вызывает ее гибель на 4—5-е сутки при характерной патолого-анатомической картине.
Источник: http://www.plam.ru/shpori/mikrobiologija/p38.php